欲色AV无码一区二区人妻,高H小月被几个老头调教,精品伦理一区二区三区,成人伊人青草久久综合网

咨詢熱線

18017847121

當(dāng)前位置:首頁(yè)  >  技術(shù)文章  >  E15天胎鼠脊髓神經(jīng)元的原代培養(yǎng)

E15天胎鼠脊髓神經(jīng)元的原代培養(yǎng)

更新時(shí)間:2021-11-10      點(diǎn)擊次數(shù):845

一、背景

神經(jīng)元原代培養(yǎng)是將胚胎哺乳動(dòng)物中樞神經(jīng)系統(tǒng)的部分組織,如大腦皮層、海馬、脊髓等腦組織直接取出,再接種培養(yǎng)的方法。目前國(guó)內(nèi)、外有關(guān)神經(jīng)元培養(yǎng)的方法較多,但在原代培養(yǎng)中神經(jīng)元的純度和產(chǎn)量方面還存在一些急待解決的問(wèn)題。由于神經(jīng)元是一種高度分化的細(xì)胞,相對(duì)于其它細(xì)胞而言,神經(jīng)元在體外更難以存活和生長(zhǎng)。因此,體外培養(yǎng)神經(jīng)元要求的培養(yǎng)方法和營(yíng)養(yǎng)條件均較為特殊。

神經(jīng)細(xì)胞的體外培養(yǎng)技術(shù)是研究神經(jīng)源性疾病的發(fā)病機(jī)制、進(jìn)程的一個(gè)重要工具,能很好的、直觀的反映離體神經(jīng)元的發(fā)育狀況和生理活性,如何建立一個(gè)穩(wěn)定成熟的神經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)體系是神經(jīng)系統(tǒng)疾病體外實(shí)驗(yàn)研究順利進(jìn)行的基礎(chǔ)。隨著基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)及臨床醫(yī)學(xué)研究的逐漸深入,神經(jīng)細(xì)胞的體外培養(yǎng)技術(shù)在腦損傷、神經(jīng)障礙性疾病、衰老相關(guān)神經(jīng)疾病方面得到廣泛重視和普及應(yīng)用。

二、實(shí)驗(yàn)步驟

(1)75% (體積分?jǐn)?shù))酒精消毒孕鼠,在無(wú)菌條件下取出胎鼠,分離并切取脊髓,置于冷的無(wú)鈣、鎂的HBSS液的平皿中( 下置冰袋)。

(2)解剖顯微鏡無(wú)菌條件下仔細(xì)剝離脊膜及血管。

(3)用彈簧剪將脊髓剪成1cm3大小,消化液37℃消化15-20min,每五分鐘振蕩一次;

(4)去掉上清,加入終止液終止消化,吹打10-15次,不能有氣泡,收集上清,剩余組織再消化一次。

(5)4℃1000rpm離心10min,棄上清,加入種植液1重懸,培養(yǎng)箱內(nèi)差速貼壁30min;

(6)收集上清,臺(tái)盼藍(lán)染色計(jì)數(shù),按6*105cells/孔種入六孔板(種植液1),37℃,5%CO2,95%飽和濕度的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

(7)培養(yǎng)第二天,全換液更換為種植液2;

(8)培養(yǎng)第四天,半量換液加入5uM的阿糖胞苷,24h全量換液;

(9)之后每周換液兩次。


blob.png       blob.png

1天                                                                                            7天

本文由上海達(dá)為科生物科技有限公司整理發(fā)布,如有轉(zhuǎn)載,請(qǐng)注明出處!








上海達(dá)為科生物科技有限公司
  • 聯(lián)系人:張
  • 地址:上海市長(zhǎng)江南路180號(hào)長(zhǎng)江軟件園B區(qū)B637室
  • 郵箱:2844970554@qq.com
  • 傳真:
關(guān)注我們

歡迎您關(guān)注我們的微信公眾號(hào)了解更多信息

掃一掃
關(guān)注我們
版權(quán)所有©2024上海達(dá)為科生物科技有限公司All Rights Reserved    備案號(hào):滬ICP備15041491號(hào)-2    sitemap.xml    總流量:115714
管理登陸    技術(shù)支持:化工儀器網(wǎng)    
仪征市| 山阴县| 政和县| 垣曲县| 高清| 边坝县| 朔州市| 华阴市| 五大连池市| 津南区| 宜都市| 尼木县| 乐安县| 永春县| 攀枝花市| 陈巴尔虎旗| 茂名市| 江北区| 岚皋县| 嘉义县| 伊川县| 兴文县| 广元市| 龙门县| 石首市| 梁平县| 灵璧县| 衢州市| 故城县| 吐鲁番市| 共和县| 鱼台县| 郓城县| 长子县| 布拖县| 林甸县| 达州市| 文安县| 武穴市| 西贡区| 泰宁县|