欲色AV无码一区二区人妻,高H小月被几个老头调教,精品伦理一区二区三区,成人伊人青草久久综合网

咨詢熱線

18017847121

當(dāng)前位置:首頁  >  技術(shù)文章  >  達(dá)為科生物E15天胎鼠脊髓神經(jīng)元的原代培養(yǎng)

達(dá)為科生物E15天胎鼠脊髓神經(jīng)元的原代培養(yǎng)

更新時(shí)間:2021-11-11      點(diǎn)擊次數(shù):791

一、背景

      神經(jīng)元原代培養(yǎng)是將胚胎哺乳動(dòng)物中樞神經(jīng)系統(tǒng)的部分組織,如大腦皮層、海馬、脊髓等腦組織直接取出,再接種培養(yǎng)的方法。目前國內(nèi)、外有關(guān)神經(jīng)元培養(yǎng)的方法較多,但在原代培養(yǎng)中神經(jīng)元的純度和產(chǎn)量方面還存在一些亟待解決的問題。由于神經(jīng)元是一種高度分化的細(xì)胞,相對于其它細(xì)胞而言,神經(jīng)元在體外更難以存活和生長。因此,體外培養(yǎng)神經(jīng)元要求的培養(yǎng)方法和營養(yǎng)條件均較為特殊。


     神經(jīng)細(xì)胞的體外培養(yǎng)技術(shù)是研究神經(jīng)源性疾病的發(fā)病機(jī)制、進(jìn)程的一個(gè)重要工具,能很好的、直觀的反映離體神經(jīng)元的發(fā)育狀況和生理活性,如何建立一個(gè)穩(wěn)定成熟的神經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)體系是神經(jīng)系統(tǒng)疾病體外實(shí)驗(yàn)研究順利進(jìn)行的基礎(chǔ)。隨著基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)及臨床醫(yī)學(xué)研究的逐漸深入,神經(jīng)細(xì)胞的體外培養(yǎng)技術(shù)在腦損傷、神經(jīng)障礙性疾病、衰老相關(guān)神經(jīng)疾病方面得到廣泛重視和普及應(yīng)用。


blob.png

blob.png



二、實(shí)驗(yàn)步驟

(1)75%酒精消毒孕鼠,在無菌條件下取出胎鼠,分離并切取脊髓,置于冷的無鈣、鎂的HBSS液的平皿中( 下置冰袋);


blob.png




blob.png

blob.png

blob.png



(2)解剖顯微鏡無菌條件下仔細(xì)剝離脊膜及血管;

(3)用彈簧剪將脊髓剪成1cm3大小,0.05%胰酶37℃消化15-20min,每五分鐘振蕩一次;

(4)去掉上清,加入終止液終止消化,吹打10-15次,不能有氣泡,收集上清,剩余組織再消化一次;

(5)4℃1000rpm離心10min,棄上清,加入種植液1重懸,培養(yǎng)箱內(nèi)差速貼壁30min;

(6)收集上清,臺盼藍(lán)染色計(jì)數(shù),按6×10^5cells/孔種入六孔板(種植液1),37℃,5%CO2,95%飽和濕度的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

(7)培養(yǎng)第二天,全換液更換為種植液2;

(8)培養(yǎng)第四天,半量換液加入5uM的阿糖胞苷,24h全量換液;

(9)之后每周換液兩次。



blob.png

1d


blob.png

7d


blob.png

β-Tubulin Ⅲ


blob.png

β-Tubulin Ⅲ






上海達(dá)為科生物科技有限公司
  • 聯(lián)系人:張
  • 地址:上海市長江南路180號長江軟件園B區(qū)B637室
  • 郵箱:2844970554@qq.com
  • 傳真:
關(guān)注我們

歡迎您關(guān)注我們的微信公眾號了解更多信息

掃一掃
關(guān)注我們
版權(quán)所有©2024上海達(dá)為科生物科技有限公司All Rights Reserved    備案號:滬ICP備15041491號-2    sitemap.xml    總流量:115714
管理登陸    技術(shù)支持:化工儀器網(wǎng)    
余姚市| 刚察县| 库尔勒市| 肥乡县| 和硕县| 丘北县| 湖北省| 霍邱县| 安宁市| 大城县| 连城县| 汉川市| 莎车县| 兴城市| 南漳县| 防城港市| 宜兰县| 元朗区| 南涧| 方正县| 凌海市| 友谊县| 阳城县| 民丰县| 奎屯市| 左贡县| 凯里市| 望谟县| 金门县| 沙河市| 师宗县| 洛阳市| 黑河市| 沾益县| 洞头县| 孟村| 连江县| 余庆县| 宁河县| 黎川县| 会理县|