大鼠腦缺血再灌注損傷模型
大鼠腦缺血再灌注損傷模型:
麻醉大鼠,然后在頸部中線切開一個切口,暴露頸外動脈和頸內動脈,用無菌縫合線結扎,血管夾夾住頸內動脈。隨后在頸總動脈上切口,然后插入線栓。2 h后,大鼠進行再灌注。模型大鼠成功構建的標準:大鼠出現(xiàn)癥狀如偏癱,對側前肢下垂和站立不穩(wěn)。Bederson評分在1-3分,48小時內沒有死亡,就認為模型成功。文獻上用的是2-3分的模型。
大鼠腦缺血再灌注損傷模型優(yōu)點:
無需開顱,創(chuàng)傷較??;缺血部位相對固定,可控性好;可實現(xiàn)腦缺血后再灌注,是理想的標準局灶性腦缺血動物模型。
大鼠腦缺血再灌注損傷模型動物選擇:
目前多選用SD大鼠??紤]大鼠雌激素水平對腦缺血損傷可能的神經(jīng)保護機制及激素水平的生理性波動對大鼠情緒的影響,采用血管解剖結構更為清晰的雄性SD大鼠作為MCAO的動物模型。
體重和鼠齡:
大鼠大腦中動脈的長度和粗細與其體重形成正比,目前多主張大鼠體重控制在250~300 g。我們在實驗中采用240~270 g大鼠。
術后再灌:
選擇缺血后2h再灌注,在大鼠體外傷口縫合處找到線頭,輕輕拔出線栓 2~3 cm 剪斷,若此時大鼠已*清醒,可注射少量麻醉后再將線栓拔出,以防拔線栓時大鼠過度掙扎加大損傷。
術后護理與并發(fā)癥:
術后將大鼠放回鼠籠、保溫,期間可將大鼠頭部微微墊高,以防側枝循環(huán)過快恢復。
大鼠腦缺血再灌注損傷模型評價方法:
神經(jīng)功能評分、TTC 染色、腦組織含水量、局部腦血流測定和頭顱磁共振等。
神經(jīng)功能評分:Bederson 評分
0分:無神經(jīng)損傷癥狀
1分:懸尾實驗不能*伸展對側前爪
2分:前肢抵抗對側推力能力下降
3分:向對側轉圈
注意事項:
00001. 線栓插入深度為從頸總動脈分叉處插入約 18 mm,即將線栓送入頸內動脈后,黑色標記點過分叉點約 1 mm,感覺稍有阻力時即停止插入。
00002. 線栓插入位置和走向:頸總動脈插入。結扎頸總動脈近心端,遠心端掛線備用,結扎頸外動脈,頸內動脈系活結或動脈夾夾住。