1. 雄性C57BL/6小鼠,10周齡。
2. 小鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)一周后,行左頸總動(dòng)脈和右腎動(dòng)脈結(jié)扎術(shù)。
3. 常規(guī)麻醉消毒后,分離左側(cè)頸總動(dòng)脈進(jìn)行結(jié)扎,然后縫合頸部皮膚。
4. 腹部右側(cè)消毒后,分離右腎動(dòng)脈進(jìn)行結(jié)扎,然后關(guān)腹;待小鼠蘇醒后放回飼養(yǎng)籠繼續(xù)飼養(yǎng)。
7. 一周后,麻醉小鼠,固定在立體定位儀上,暴露顱骨,確認(rèn)Bregma點(diǎn)。
8. 在Bregma點(diǎn)前1.2mm、右側(cè)0.7mm的位點(diǎn)轉(zhuǎn)孔,顱平面下深度4.7mm的位置注射彈性蛋白酶到大腦基底池。
9. 彈性蛋白酶以0.5μl/min的速度,注射2.5μl(35mU),停針10min。
10. 彈性蛋白酶注射后,縫合小鼠皮膚。
11. 將預(yù)先充好血管緊張素的微滲透泵埋置在小鼠背部皮下。
12. 微滲透泵速度1000ng/kg/min 。
13. 每日監(jiān)測(cè)小鼠的神經(jīng)癥狀,如小鼠出現(xiàn)不活動(dòng)、癱瘓、體重≥15%的降低,立即終止實(shí)驗(yàn),檢查大腦顱底Willis血管環(huán)。
14. 實(shí)驗(yàn)的第21天,所有小鼠心臟灌注3ml 4%的多聚甲醛,隨后溴酚藍(lán)明膠溶液心臟灌注,體視鏡下檢查大腦顱底Willis血管環(huán)附近顱動(dòng)脈瘤形成及破裂情況。
15. 小鼠顱底拍照示顱內(nèi)動(dòng)脈瘤形成情況。
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