欲色AV无码一区二区人妻,高H小月被几个老头调教,精品伦理一区二区三区,成人伊人青草久久综合网

咨詢熱線

18017847121

當(dāng)前位置:首頁  >  技術(shù)文章  >  甲基化檢測的主要方法如下

甲基化檢測的主要方法如下

更新時間:2024-08-30      點擊次數(shù):117
  甲基化檢測是一種用于分析和檢測DNA甲基化狀態(tài)的技術(shù)手段,它在生物學(xué)和醫(yī)學(xué)研究中具有廣泛的應(yīng)用。DNA甲基化是最早發(fā)現(xiàn)的基因表觀修飾方式之一,它發(fā)生在DNA分子的胞嘧啶堿基上,通過添加甲基基團(tuán)來調(diào)控基因的表達(dá)。甲基化通常發(fā)生在CpG二核苷酸的胞嘧啶5’碳位,形成5’-甲基胞嘧啶。這種修飾方式可以在不改變DNA序列的前提下,實現(xiàn)對基因表達(dá)的調(diào)控。甲基化檢測就是通過各種技術(shù)手段來檢測和分析DNA分子上的甲基化狀態(tài)。
  甲基化檢測的主要方法:
  1、甲基化特異性的PCR
  原理:用亞硫酸氫鹽處理基因組DNA,使所有未發(fā)生甲基化的胞嘧啶被轉(zhuǎn)化為尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶保持不變。隨后設(shè)計針對甲基化和非甲基化序列的特異性引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增。
  檢測:通過電泳檢測PCR擴(kuò)增產(chǎn)物,如果能用針對處理后甲基化DNA鏈的引物得到擴(kuò)增片段,則說明該位點存在甲基化;反之,則說明被檢測的位點不存在甲基化。
  2、亞硫酸氫鹽測序法
  原理:同樣使用亞硫酸氫鹽處理基因組DNA,未甲基化的胞嘧啶轉(zhuǎn)化為尿嘧啶,甲基化的胞嘧啶保持不變。隨后進(jìn)行PCR擴(kuò)增,在擴(kuò)增過程中尿嘧啶全部轉(zhuǎn)化為胸腺嘧啶。最后對PCR產(chǎn)物進(jìn)行測序,以判斷CpG位點是否發(fā)生甲基化。
  方法:分為BSP-直接測序法和BSP-克隆測序法。后者將PCR產(chǎn)物克隆至載體后進(jìn)行測序,以提高測序成功率。
  3、高分辨率熔解曲線法
  原理:在非CpG島位置設(shè)計一對針對亞硫酸氫鹽修飾后的DNA雙鏈的引物,這對引物中間的片段包含感興趣的CpG島。若CpG島發(fā)生甲基化,則經(jīng)亞硫酸氫鹽處理和PCR擴(kuò)增后,樣品中的GC含量發(fā)生改變,從而導(dǎo)致熔解溫度的變化。
  檢測:通過監(jiān)測熔解溫度的變化來判斷CpG位點的甲基化狀態(tài)。
上海達(dá)為科生物科技有限公司
  • 聯(lián)系人:張
  • 地址:上海市長江南路180號長江軟件園B區(qū)B637室
  • 郵箱:2844970554@qq.com
  • 傳真:
關(guān)注我們

歡迎您關(guān)注我們的微信公眾號了解更多信息

掃一掃
關(guān)注我們
版權(quán)所有©2024上海達(dá)為科生物科技有限公司All Rights Reserved    備案號:滬ICP備15041491號-2    sitemap.xml    總流量:115714
管理登陸    技術(shù)支持:化工儀器網(wǎng)    
贵定县| 东方市| 绍兴县| 临沧市| 凉城县| 武汉市| 闽侯县| 佳木斯市| 禹城市| 延津县| 嘉峪关市| 读书| 玛曲县| 崇阳县| 怀仁县| 锡林郭勒盟| 鄱阳县| 漾濞| 罗江县| 石楼县| 册亨县| 常山县| 广安市| 元氏县| 枣阳市| 抚宁县| 蛟河市| 八宿县| 秀山| 宿松县| 绩溪县| 河南省| 汝南县| 钟祥市| 博罗县| 长丰县| 望奎县| 洛川县| 方城县| 淮北市| 汉中市|