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簡要描述:免疫組化實驗:通過化學(xué)反應(yīng)使標(biāo)記抗體的顯色劑顯色來確定組織細胞內(nèi)抗原(多肽和蛋白質(zhì)),對其進行定位、定性及相對定量的研究,稱為免疫組織化學(xué)技術(shù)或免疫細胞化學(xué)技術(shù)。
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免疫組化實驗
免疫組織化學(xué)技術(shù)按照標(biāo)記物的種類可分為免疫熒光法、免疫酶法、免疫鐵蛋白法、免疫金法及放射免疫自顯影法等。這些常用免疫組織化學(xué)方法的原理如下:1. 免疫熒光細胞化學(xué)技術(shù)將已知抗體標(biāo)上熒光素,以此作為探針檢查細胞或組織內(nèi)的相應(yīng)抗原,在熒光顯微鏡下觀察.當(dāng)抗原抗體復(fù)合物中的熒光素受激發(fā)光的照射后會發(fā)出一定波長的熒光,從而可以確定組織中的抗原定位或定量.2. 免疫酶細胞化學(xué)技術(shù)是免疫組織化學(xué)研究的技術(shù).基本原理是先以酶標(biāo)記的抗體與組織或細胞作用,然后加入酶的底物,生成有色的不溶性產(chǎn)物或具有一定電子密度的顆粒,通過光鏡或電鏡,對細胞或組織內(nèi)的相應(yīng)抗原進行定位或定性研究.3. 免疫膠體金技術(shù)就是用膠體金標(biāo)記一抗,二抗或其他的能特異性的結(jié)合免疫球蛋白的分子(如葡萄球菌A蛋白)等作為探針對組織或細胞內(nèi)的抗原進行定性,定位或定量研究.由于膠體金的電子密度高,多用于免疫電鏡的單標(biāo)記或多標(biāo)記的定位研究.
免疫組化實驗主要步驟:1.洗載玻片2.包埋組織3.切片4.撈組織5.脫蠟6.抗原修復(fù)7.血清封閉8.加一抗9.加二抗10.加SABC11.加顯色劑12.復(fù)染13.脫水14.封片服務(wù)內(nèi)容:包含抗體,包埋,切片,染色以及拍照。
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