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簡要描述:細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)是正常細(xì)胞的基本功能之一,是機(jī)體正常生長發(fā)育的生理過程,也是活細(xì)胞普遍存在的一種運(yùn)動形式。
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細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)是簡捷測定細(xì)胞遷移運(yùn)動與修復(fù)能力的方法,在體外培養(yǎng)皿或平板培養(yǎng)的單層貼壁細(xì)胞上,用微量槍頭或其它硬物在細(xì)胞生長的中央?yún)^(qū)域劃線,去除中央部分的細(xì)胞,然后繼續(xù)培養(yǎng)細(xì)胞至實(shí)驗(yàn)設(shè)定的時間是一種簡單易行的檢測細(xì)胞運(yùn)動的方法,實(shí)驗(yàn)成本低,可以用來檢測貼壁生長腫瘤細(xì)胞的侵襲轉(zhuǎn)移能力。
Transwell的基本原理是將transwell小室放入培養(yǎng)板中,小室內(nèi)稱為上室,培養(yǎng)板內(nèi)稱為下室,上下層培養(yǎng)液以聚碳酸酯膜相隔,上室內(nèi)添加上層培養(yǎng)液,下室內(nèi)添加下層培養(yǎng)液。將細(xì)胞種在上室內(nèi),由于膜有通透性,下層培養(yǎng)液中的成分可以影響到上室內(nèi)的細(xì)胞,從而可以研究下層培養(yǎng)液中的成分對細(xì)胞生長、運(yùn)動等的影響。
細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)流程
1. 用marker筆在6孔板背后均勻得劃橫線;
2. 在孔中加入細(xì)胞;
3. 第二天用槍頭垂至于背后的橫線劃痕;
4. 用PBS洗去處劃下的細(xì)胞,培養(yǎng)不同時間,取樣,拍照;
5. 數(shù)據(jù)處理:每個時間點(diǎn)細(xì)胞整體遷移距離=每個時間點(diǎn)距離長度-0時距離;
6. 結(jié)果統(tǒng)計(jì)分析。
Transwell實(shí)驗(yàn)
1. 采用未鋪 Matrigel 膠的 Transwell 小室用于實(shí)驗(yàn);
2. 制備細(xì)胞懸液;
3. 接種細(xì)胞;
4. 檢測穿過的細(xì)胞數(shù);
5. 結(jié)果統(tǒng)計(jì)分析。
客戶提供
細(xì)胞株(凍存株或培養(yǎng)好的細(xì)胞),所需藥品,藥物處理方式和濃度。
公司提供
基本實(shí)驗(yàn)步驟、圖片、數(shù)據(jù)分析結(jié)果、剩余藥品。
實(shí)驗(yàn)周期:大約2-3周左右,具體需要根據(jù)細(xì)胞生長情況及實(shí)驗(yàn)內(nèi)容而定。
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