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簡(jiǎn)要描述:細(xì)胞凋亡染色實(shí)驗(yàn):細(xì)胞凋亡(apoptosis)指為維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定,由基因控制的細(xì)胞自主的有序的死亡。
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細(xì)胞凋亡可以用TNNEL法檢測(cè),TUNEL(TdT-mediated DUTP nick end labeling)細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒是用來(lái)檢測(cè)組織細(xì)胞在凋亡早期過(guò)程中細(xì)胞核DNA的斷裂情況。其原理是熒光素(fluorescein)標(biāo)記的dUTP在脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶(TdT Enzyme)的作用下,可以連接到凋亡細(xì)胞中斷裂DNA的3’-OH末端,并與連接辣根過(guò)氧化物酶(HRP,horse-radish peroxidase)的熒光素抗體特異性結(jié)合,后者又與HRP第五二氨基聯(lián)苯胺(DAB)反應(yīng)產(chǎn)生很強(qiáng)的顏色反應(yīng)(呈深棕色),特異準(zhǔn)確地定位正在凋亡的細(xì)胞,因而在光學(xué)顯微鏡下即可觀(guān)察凋亡細(xì)胞。由于正常的或正在增值的細(xì)胞幾乎沒(méi)有DNA斷裂,因而沒(méi)有3’-OH形成,很少能夠被染色。TUNEL細(xì)胞凋亡試劑盒適用于組織樣本(石蠟包埋、冰凍和超薄切片)和細(xì)胞樣本(細(xì)胞涂片)在單細(xì)胞水平上的凋亡原位檢測(cè)。
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