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簡要描述:組織包埋實(shí)驗(yàn)是達(dá)為科生物的基礎(chǔ)服務(wù)項(xiàng)目之一,是病理檢測的基礎(chǔ)步驟之一,由基爾頓生物病理平臺(tái)經(jīng)驗(yàn)豐富的實(shí)驗(yàn)人員操作完成。
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取材固定:離體的組織不及時(shí)固定,組織就會(huì)自溶,抗原就會(huì)擴(kuò)散。固定就是加入一些可以讓蛋白質(zhì)變性的物質(zhì)(比如說甲醛),使得蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)被固定住,不再發(fā)生變化,同時(shí)也不會(huì)再發(fā)生-一些活性反應(yīng),這樣才好做后續(xù)的染色步驟。常見固定液是4%的多聚甲醛。根據(jù)不同目的、組織特征代表性取材。取的材料應(yīng)該小而薄。便于固定劑迅速滲入內(nèi)部,一般厚度不超過2mm,大小不超過5X5mm。每個(gè)組織多切幾塊。新鮮組織固定(組織塊不宜太大太厚,這樣固定液很難進(jìn)入里面,可能會(huì)導(dǎo)致在較短的時(shí)間內(nèi)脫水不*,引起一系列的問題,比如浸蠟不*,切片不好完成,切不完整。導(dǎo)致后來切片染色的脫落,造成染色的失敗。組織塊也不能太小,否則不能保證切片數(shù)量,且透明時(shí)間和浸蠟時(shí)間不能很好的把握。)固定時(shí)間因固定劑種類而異,大多6-12小時(shí),一般不超過12 小時(shí)。視組織固定的難易程度而定。后續(xù)如果做免疫組化,不應(yīng)超過12 小時(shí);后續(xù)如果做HE染色,不
應(yīng)超過24小時(shí)。固定完之后用水洗(目的:洗去滲入組織的固定液,終止固定以免影響對(duì)組織的內(nèi)結(jié)構(gòu)的觀察,分析。換液兩次,一次半小時(shí)。)之后可直接脫水包埋或放入75%的乙醇4度可長期保存。
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