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簡要描述:細胞激光共聚焦技術(shù)服務(wù)是達為科生物的基礎(chǔ)服務(wù)項目之一,由細胞平臺經(jīng)驗豐富的實驗人員操作完成。
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激光掃描共聚焦熒光顯微鏡(laser scanning confocal microscopy,LSCM)是一種利用計算機、激光和圖像處理技術(shù)獲得生物樣品三維數(shù)據(jù)、目前*的分子細胞生物學(xué)的分析儀器。它是在熒光顯微鏡成像的基礎(chǔ)上加裝了激光掃描裝置,利用計算機進行圖像處理,使用紫外光或激光激發(fā)熒光探針,從而得到細胞或組織內(nèi)部微細結(jié)構(gòu)的熒光圖像,觀察細胞的形態(tài)變化或生理功能的改變。激光共聚焦已成為形態(tài)學(xué)、分子細胞生物學(xué)、神經(jīng)科學(xué)、藥理學(xué)和遺傳學(xué)等領(lǐng)域中新的有力研究工具。
應(yīng)用領(lǐng)域
在細胞及分子生物學(xué)基礎(chǔ)研究中的應(yīng)用
激光掃描共聚焦顯微鏡應(yīng)用照明針與檢測孔共軛成像,有效抑制了焦外模糊成像并可對標(biāo)本各層分別成像,對活細胞行無損傷的“光學(xué)切片”這種功能也被形象的稱為“顯微 CT”。CLSM 還可以對貼壁的單個細胞或細胞群的胞內(nèi)、胞外熒光作定位、定性、定量及實時分析,并對胞內(nèi)成分如線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體、DNA、RNA、Ca2+、Mg2+、Na+ 等的分布、含量等進行測定及動態(tài)觀察,使細胞結(jié)構(gòu)和功能方面的研究達到分子水平。
在腫瘤和抗癌藥物篩選研究中的應(yīng)用
普通顯微鏡及電子顯微鏡,僅能對腫瘤相關(guān)抗原進行定性分析,而 CLSM 則可對單標(biāo)記或者多標(biāo)記細胞、組織標(biāo)本及活細胞進行重復(fù)性很好的熒光定量分析,從而對腫瘤細胞的抗原表達、細胞結(jié)構(gòu)特征,抗腫瘤藥物的作用及機制等方面定量化 。
在血液病學(xué)和醫(yī)學(xué)免疫學(xué)研究中的應(yīng)用
激光掃描共聚焦顯微鏡觀察免疫細胞和系統(tǒng),如樹突狀細胞、單核-吞噬細胞系統(tǒng)、自然殺傷細胞、淋巴細胞時,在準(zhǔn)確細胞定位的同時有效鑒定免疫細胞的性質(zhì)。
在大腦和神經(jīng)科學(xué)中的應(yīng)用
激光掃描共聚焦顯微鏡分層掃描發(fā)現(xiàn)神經(jīng)軸突的內(nèi)部結(jié)構(gòu)連續(xù)性好。用激光掃描共聚焦顯微鏡能觀察到腦干組織中神經(jīng)軸突的正常走向,可排除在熒光顯微鏡下由此造成的一些病理假象 。并且激光掃描共聚焦顯微鏡能觀察神經(jīng)軸突的三維結(jié)構(gòu),因此應(yīng)用 CLSM 有可能觀察到普通光鏡下未能發(fā)現(xiàn)的神經(jīng)組織的細微病變。
在眼科研究中的應(yīng)用
利用激光掃描共聚焦顯微鏡可以觀察晶狀體,角膜、視網(wǎng)膜、虹膜和睫狀體的結(jié)構(gòu)和病理變化。
在骨科研究領(lǐng)域中的應(yīng)用
激光掃描共聚焦顯微鏡在骨科研究領(lǐng)域的應(yīng)用現(xiàn)狀表明,CLSM在觀測骨細胞形態(tài)學(xué)研究、骨細胞特異性蛋白(骨鈣素)以及骨細胞之間的相互作用具有顯著的優(yōu)勢。
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