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簡要描述:SYBR Green染料法實(shí)驗(yàn)是實(shí)時(shí)熒光定量PCR常用的方法之一,SYBR Green I染料是一種直接與雙鏈DNA (dsDNA) 結(jié)合的熒光染料。
詳細(xì)介紹
SYBR Green I染料是一種直接與雙鏈DNA (dsDNA) 結(jié)合的熒光染料,是熒光定量PCR常用的DNA結(jié)合染料。在定量PCR中,SYBR Green I可與雙鏈DNA ( dsDNA)非特異性結(jié)合后發(fā)出熒光,則可以通過檢測反應(yīng)體系中的SYBR GreenI熒光強(qiáng)度,達(dá)到檢測PCR產(chǎn)物擴(kuò)增量的目的。游離狀態(tài)下,SYBR Green I發(fā)出微弱的熒光,一旦與dsDNA 結(jié)合,其熒光增加1000倍,一個(gè)反應(yīng)發(fā)出的全部熒光信號與出現(xiàn)的dsDNA 量成比例,且會隨擴(kuò)增產(chǎn)物的增加而增加;所以通過檢測PCR反應(yīng)液中的熒光信號強(qiáng)度,可以對目的基因進(jìn)行準(zhǔn)確定量,同時(shí)還可以測定擴(kuò)增的目的DNA 的片段的熔解溫度。
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