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簡要描述:病理MASSON染色:Masson染液是用于顯示組織中纖維的染色方法之一,是膠原纖維染色經(jīng)典的技術(shù)方法。
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Masson染液是利用兩種或三種陰離子染料混合一起或先后作用完成,與陰離子染料分子的大小和組織的滲透性有關(guān)。根據(jù)組織不同的滲透性能,選擇分子大小不同的陰離子的染料進行染色,便可吧不同組織成分顯示出來。
Masson染液是用于顯示組織中纖維的染色方法之一,是膠原纖維染色經(jīng)典的技術(shù)方法。主要適用于膠原蛋白和平滑肌的鑒別分析。廣泛用于結(jié)締組織、肌肉組織和膠原蛋白的研究等。
實驗步驟:
1脫蠟:65度30分鐘,二甲苯脫蠟 5min×2次
2水化:將脫蠟后的切片經(jīng)100%酒精,95%酒精,85%酒精,75%酒精,雙蒸水各3min
3溫?zé)崴矗?0-40℃溫?zé)崴矗看?0-60秒,共兩次。(可以分兩缸溫?zé)崴M行漂洗,直至玻片上除樣本以外,其余部分均沒有顆粒狀水珠為止。)
4 染色前先用蒸餾水潤濕玻片30~60秒。
5 R1核染液(試劑盒提供)染色60s左右,倒丟,沖洗液沖洗30s左右。
6 R2漿染液(試劑盒提供)染色30-60s,倒丟,沖洗液沖洗30s左右。
7 R3黃色分色液(試劑盒提供)分色6-8min左右(鏡下觀察樣本中膠原纖維部分褪成淡粉紅色為宜。如果褪色效果不佳,可適當延長時間,使得膠原纖維更易著色)。棄去分色液,(注意不需沖洗)。
8 直接用R4藍色復(fù)染液(試劑盒提供)染色5min左右,倒丟,用無水乙醇沖洗干凈。
9 放入烘箱(50-60攝氏度)烘干,中性樹膠封片。
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