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簡(jiǎn)要描述:Tunel實(shí)驗(yàn):TUNEL(TdT-mediated DUTP nick end labeling)細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒是用來(lái)檢測(cè)組織細(xì)胞在凋亡早期過(guò)程中細(xì)胞核DNA的斷裂情況。
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TUNEL 細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒是采用非同位素方法來(lái)檢測(cè)細(xì)胞在凋亡過(guò)程中DNA 的斷裂情況,可在原位快速準(zhǔn)確地檢測(cè)單個(gè)凋亡細(xì)胞。本試劑盒適用于組織樣本(石蠟包埋、冰凍和超薄切片)和細(xì)胞樣本(細(xì)胞涂片)的凋亡原位檢測(cè)。
其原理是細(xì)胞凋亡發(fā)生時(shí),內(nèi)源性核酸酶激活,使DNA的雙鏈斷裂或一條鏈出現(xiàn)缺口,產(chǎn)生一系列3’-OH末端,在脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶(TdT)作用下,組織細(xì)胞原位DNA切口可被標(biāo)記上生物素-dUTP,即TUNEL(Terminal deoxynucleotidyl Transferase Biotin-dUTP Nick End Labeling),可與連接了的辣根過(guò)氧化酶的鏈霉親和素(Streptavidin-HRP)特異結(jié)合,在辣根過(guò)氧化酶底物二氨基聯(lián)苯胺(DAB)的存在下,顯示為棕色(過(guò)氧化物酶活性),特異準(zhǔn)確地定位正在凋亡的細(xì)胞,在普通顯微鏡下即可觀察和計(jì)數(shù)凋亡細(xì)胞;由于正的或正在增殖的細(xì)胞幾乎沒有DNA 的斷裂,因而沒有3'-OH 形成,很少能夠被染色。
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