當(dāng)前位置:首頁 > 產(chǎn)品中心 > 實(shí)驗(yàn) > 分子實(shí)驗(yàn) > 外泌體指標(biāo)鑒定實(shí)驗(yàn)
簡(jiǎn)要描述:外泌體指標(biāo)鑒定實(shí)驗(yàn):外泌體是指包含了復(fù)雜 RNA 和蛋白質(zhì)的小膜泡 (30-150nm),現(xiàn)今,其特指直徑在40-100nm的盤狀囊泡。
相關(guān)文章
Related Articles詳細(xì)介紹
一、實(shí)驗(yàn)原理
所有培養(yǎng)的細(xì)胞類型均可分泌外泌體,且外泌體天然存在于體液中,包括血液、唾液、尿液、腦脊液和乳汁中。 有關(guān)他們分泌和攝取及其組成、“運(yùn)載物”和相應(yīng)功能的分子機(jī)制剛剛開始研究。 外泌體目前被視為特異性分泌的膜泡,參與細(xì)胞間通訊,對(duì)外泌體的研究興趣日益增長(zhǎng),無論是研究其功能還是了解如何將其用于微創(chuàng)診斷的開發(fā)。
外泌體(Exosome)主要檢測(cè)指標(biāo)為CD63、CD9、CD81、Tsg101、Alix、HSP70等,針對(duì)外泌體的定性檢測(cè),至少選擇2-3個(gè)指標(biāo)就能滿足文章發(fā)表就可以。大部分文獻(xiàn)中沒有檢測(cè)內(nèi)參,個(gè)別文章中使用了Actin、GAPDH和Tubulin作為內(nèi)參進(jìn)行檢測(cè),外泌體中的Actin、GAPDH和Tubulin的表達(dá)豐度相對(duì)于正常細(xì)胞樣品中的較低,可能會(huì)檢測(cè)不到任何條帶或者條帶微弱。
二、實(shí)驗(yàn)流程
1. 外泌體BCA法定量。
2. 變性聚丙烯酰胺不連續(xù)凝膠電泳(SDS-PAGE)。
3. 蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移到PVDF膜。
4. 膜的封閉和抗體孵育。
5. 結(jié)果檢測(cè)。
產(chǎn)品咨詢
歡迎您關(guān)注我們的微信公眾號(hào)了解更多信息