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簡(jiǎn)要描述:腫瘤細(xì)胞平板克隆實(shí)驗(yàn)是達(dá)為科生物的基礎(chǔ)服務(wù)項(xiàng)目之一,由細(xì)胞平臺(tái)經(jīng)驗(yàn)豐富的實(shí)驗(yàn)人員操作完成。
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單個(gè)細(xì)胞在體外增殖6代以上(時(shí)間約1周以上),其后代所形成的細(xì)胞群體,稱(chēng)為集落或克隆。每個(gè)克隆含有50個(gè)以上的細(xì)胞,大小在0.3-1.0mm之間。細(xì)胞接種存活率只表示接種細(xì)胞后貼壁的細(xì)胞數(shù),但貼壁后的細(xì)胞不一定每個(gè)都能增殖并形成克隆。只有同時(shí)具有貼壁和增殖活力的細(xì)胞才會(huì)形成克隆。
克隆形成率反映細(xì)胞的獨(dú)立生存能力的強(qiáng)弱,用于評(píng)價(jià)細(xì)胞群體依賴(lài)性和增殖能力。由于細(xì)胞生物學(xué)性狀不同,細(xì)胞克隆形成率差別也很大,一般初代培養(yǎng)細(xì)胞克隆形成率弱,傳代細(xì)胞系強(qiáng); 二倍體細(xì)胞克隆形成率弱,轉(zhuǎn)化細(xì)胞系強(qiáng);正常細(xì)胞克隆形成率弱,腫瘤細(xì)胞強(qiáng)。克隆形成率與接種密度有一定關(guān)系,做克隆形成率測(cè)定時(shí),接種細(xì)胞一定要分散成單細(xì)胞懸液,直接接種在培養(yǎng)皿中,持續(xù)一周以上,隨時(shí)檢查,到細(xì)胞形成克隆時(shí)終止培養(yǎng)。
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