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簡要描述:上海達為科力于臨床前藥效學CRO實驗,多年的IHC免疫組化染色技術(shù)服務(wù)經(jīng)驗,為廣大藥效學實驗提供保障。
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IHC免疫組化染色技術(shù)服務(wù)介紹:
我們?yōu)槟峁?span style="text-wrap: wrap;">IHC免疫組化染色技術(shù)服務(wù),免疫細胞化學ICC ,原位分子雜交ISH 等組織形態(tài)學方面的一站式技術(shù)服務(wù),包括實驗設(shè)計、實驗操作、圖片采集,實驗結(jié)果分析等方面,也可以承接階段性的技術(shù)服務(wù)。檢測指標:腫瘤標志物、癌基因及抑癌基因蛋白、細胞周期蛋白、凋亡基因蛋白、細胞表面抗原等。 樣本及來源:石蠟切片、冰凍切片、細胞涂片或培養(yǎng)細胞;來源于人、小鼠、大鼠或其它組織的包埋與切片。
技術(shù)特點和優(yōu)勢
IHC技術(shù)的特點包括高特異性、能夠在組織水平上定位蛋白質(zhì)、適用于固定和新鮮組織樣本等。它的優(yōu)勢在于能夠提供關(guān)于蛋白質(zhì)在細胞和組織中分布的詳細信息,這對于理解生物學過程和疾病機制至關(guān)重要。
石蠟切片免疫組化:
①67℃烘箱烘片2小時,常規(guī)脫蠟至水,用pH 7.4的PBS沖洗三次,每次3 min;
②將切片置于沸騰的檸檬酸鹽緩沖液中中檔微波處理10 min,蒸餾水沖洗三次,PBS沖洗三次,每次3 min;
③3%H2O2室溫孵育10 min阻斷內(nèi)源性過氧化物酶的活性,PBS沖洗三次,每次3 min;
④5~10%正常山羊血清(PBS稀釋)封閉,室溫孵育10 min,吸去血清后滴加稀釋至適當比例的一抗,37℃孵育1-2 h或者4℃孵育過夜;
⑤PBS沖洗三次,每次3 min;⑤滴加稀釋至適當比例的帶標記二抗,37℃孵育10~30 min,PBS沖洗三次,每次3 min;
⑥滴加適當比例稀釋的辣根酶標記物工作液,37℃孵育10~30 min,PBS沖洗三次,每次3 min;
⑦顯色劑顯色,自來水充分沖洗,復(fù)染細胞核,酒精脫水、二甲苯透明、中性樹膠封固。
冰凍切片免疫組化:
①新鮮組織立即在恒冷冰凍切片機內(nèi)切片,厚度為5~6 μm;
②載玻片可不打底,裱片后立刻用電吹風吹干;
③染色前需用冷丙.酮4℃固定10~20 min;
④PBS洗2次,每次5 min;
⑤3%H2O2滅活內(nèi)源性過氧化物酶20 min,需避光處理;
⑥后續(xù)血清封閉與抗體孵育步驟與石蠟切片相似,最后脫水透明封片進行觀察。
根據(jù)最新的信息,我們可能會提供最新的抗體和檢測系統(tǒng),以及優(yōu)化的染色方案,以適應(yīng)不同的研究需求和提高實驗結(jié)果的質(zhì)量。
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