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腎小管間質(zhì)纖維化模型構(gòu)建

簡要描述:腎小管間質(zhì)纖維化模型構(gòu)建:臨床上人類腎小管間質(zhì)纖維化是多種慢性非腫瘤性腎臟疾病長期遷延,最終導(dǎo)致慢性腎功能衰竭的主要病理基礎(chǔ),它以腎小管損傷、腎間質(zhì)炎癥細(xì)胞浸潤、纖維化為主要特征。由于人類腎問質(zhì)纖維化的臨床病程漫長,病因復(fù)雜,加上病理取材的限制,對其病理過程進(jìn)行動態(tài)研究較為困難

  • 更新時間:2024-09-19
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詳細(xì)介紹

腎小管間質(zhì)纖維化模型的構(gòu)建方法

腎小管間質(zhì)纖維化(Renal Interstitial Fibrosis, RIF)是慢性腎臟病進(jìn)展的關(guān)鍵環(huán)節(jié),構(gòu)建相應(yīng)的動物模型對于研究疾病機(jī)制和新藥物的開發(fā)至關(guān)重要。

以下是幾種常用的腎小管間質(zhì)纖維化模型構(gòu)建方法:

  1.單側(cè)輸尿管梗阻(Unilateral Ureteral Obstruction, UUO)模型:這是目前應(yīng)用zui廣泛的腎小管間質(zhì)纖維化動物模型。通過結(jié)扎大鼠的單側(cè)輸尿管,造成尿液回

流和腎內(nèi)高壓,進(jìn)而引發(fā)腎小管損傷和間質(zhì)纖維化。這種模型的優(yōu)點(diǎn)是操作簡單,病變均一,有較好的重復(fù)性,且能夠在短時間內(nèi)迅速發(fā)展出纖維化病變。

例:體重為250~300g的成年大鼠,經(jīng)腹腔注射5%shuihelvquan麻醉,麻醉后取仰臥位固定于手術(shù)板上。動物腹部手術(shù)區(qū)常規(guī)消毒及去毛,沿腹中線作手術(shù)切口,依次切開皮膚和肌肉,游離腎臟和輸尿管,用zuzhiqian托起左側(cè)輸尿管中段部位,zhixueqian夾住,在兩端用4-0號絲線分兩次結(jié)扎左側(cè)輸尿管近腎盂段,剪斷輸尿管,然后常規(guī)縫合肌肉和皮膚。術(shù)后動物常規(guī)單籠飼養(yǎng)觀察,自由飲水及進(jìn)食。于術(shù)后第7, 14, 21, 28日動物麻醉后右股動脈放血處死,分離血清作生化測定;處死前1d在禁食不禁水的條件下,收集大鼠24h尿液測尿量。取左腎組織標(biāo)本經(jīng)固定液固定后,作常規(guī)組織切片,光鏡下觀察。


腎小管間質(zhì)纖維化模型構(gòu)建

 

 2.腎靜脈結(jié)扎模型:通過結(jié)扎大鼠的腎靜脈,造成慢性淤血性缺血,從而誘發(fā)腎小管間質(zhì)纖維化。這種模型的病變典型而穩(wěn)定,與人類腎小管間質(zhì)纖維化的病變非常

相似,且操作簡單,周期短。

例:選用 Wistar 大鼠,體重 200~250g。用 8.5%shuihelvquan(0.1ml/kg)腹腔注射麻醉動物。經(jīng)腹分離左腎靜脈,用 4-0 號手術(shù)縫線結(jié)扎,關(guān)腹,整個手術(shù)過程約 20 分鐘。分別于手術(shù)后第 5 天、第 10 天,第 15 天、第 20 天和第 25 天各處死 5 只大鼠,重點(diǎn)觀察結(jié)扎側(cè)腎臟。殺死前,將大鼠置于代謝籠中,留 24 小時尿,測尿常規(guī);股動脈取血,測血肌酐(SCr)含量。雙側(cè)腎臟組織經(jīng) 10%甲醛液固定,常規(guī)脫水、包埋,4μm 厚石蠟切片。分別進(jìn)行 HE.PASM.PAS,Masson 染色。

  

3qingdameisu誘導(dǎo)模型:通過給予qingdameisu誘導(dǎo)腎小管損傷,進(jìn)而促進(jìn)間質(zhì)纖維化的發(fā)展。這種模型適用于研究腎毒性藥物引起的腎損傷和纖維化。


腎小管間質(zhì)纖維化模型構(gòu)建過程中,需要嚴(yán)格遵守實驗操作規(guī)程,以確保模型的成功和動物福利。模型的驗證通常涉及生化指標(biāo)檢測(如血清肌酐和尿素氮)、尿液分析、以及腎組織的病理學(xué)檢查,以確認(rèn)腎小管間質(zhì)纖維化的特征。

在設(shè)計實驗時,應(yīng)考慮模型的特點(diǎn)和局限性,選擇zuishihe研究目的的模型。同時,應(yīng)關(guān)注最新的研究進(jìn)展,以采用最佳實踐和技術(shù)。




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