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多囊卵巢模型構(gòu)建

簡要描述:多囊卵巢模型構(gòu)建:多囊卵巢是生育年齡婦女常見的一種復雜的內(nèi)分泌及代謝異常所致的疾病,主要特征為慢性無排卵(排卵功能紊亂或喪失)和高雄激素血癥(婦女體內(nèi)男性激素產(chǎn)生過剩),臨床表現(xiàn)為月經(jīng)周期不規(guī)律、不孕、多毛和/或痤瘡,是最常見的女性內(nèi)分泌疾病。

  • 更新時間:2024-09-19
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詳細介紹

多囊卵巢模型構(gòu)建方法

多囊卵巢綜合征(PCOS)是一種復雜的內(nèi)分泌疾病,影響女性的生殖健康和代謝。為了研究PCOS的發(fā)病機制和潛在治療方法,科學家們開發(fā)了多種動物模型。

以下是大鼠多囊卵巢模型構(gòu)建的常用方法:

  1.藥物誘導法:使用外源性雄激素,如脫氫表雄酮(DHEA)或liusuanpulagaotongna,通過皮下注射的方式給予動物。例如,可以從21日齡開始,每天注射一定          劑量的liusuanpulagaotongna,連續(xù)注射20天,以建立PCOS模型。

  1.遺傳修飾法:利用基因工程技術(shù)創(chuàng)建攜帶PCOS相關(guān)基因突變的動物模型。

  1.飲食誘導法:通過高脂飲食或高糖高脂飲食誘導動物模型,模擬PCOS患者的代謝異常。有時,藥物誘導和飲食誘導會結(jié)合使用,以增強模型的PCOS特征。


例: 21日齡未成年雌性SD大鼠,注射用liusuanpulagaotongna,注射用水,血清睪酮(T)、雌二醇(E?)、huangtitong(P)、催乳素(PRL)檢測試劑盒。

模型鼠于21日齡斷乳,喂以顆粒飼料,自由飲水,適應性喂養(yǎng)2天。第23 日開始每日皮下注射liusuanpulagaotongna9mg/100g(相當于DHEA6mg/100g)+0.4ml注射用水,連續(xù)20天,以建立PCOS大鼠模型。大鼠于注藥后21日晨用6%shuihelvquan麻醉,摘取雙側(cè)卵巢,在解剖顯微鏡下去除卵巢表面脂肪組織,稱重,分別用4%多甲醛固定作光鏡HE 染色及2.5%戊二醛固定作透視電鏡檢查。于注藥后21日晨取大鼠下腔靜脈血,3000r/min,離心3分鐘,收集血清,-20℃保存。采用化學免疫發(fā)光法檢測血清中T、E?、P、PRL含量。

【模型特點】

1.卵巢體積偏大,表面蒼白,可見較多囊性擴張的卵泡,重量明顯高于正常卵巢。

2.光鏡HE 染色觀察,卵巢切面沿包膜下見較多大小基本一致的囊性擴張的卵泡,卵泡內(nèi)卵母細胞或放射冠消失,顆粒細胞排列松散,顆粒細胞層變薄至2~3層甚至消失,卵泡膜細胞增生,較少有黃體形成。

3.透視電鏡觀察,卵巢顆粒細胞層數(shù)減少,細胞器數(shù)量及細胞內(nèi)脂滴減少,顆粒細胞形態(tài)變形,呈梭形變,細胞核核形不整,核內(nèi)染色質(zhì)濃集。細胞間纖維增生,線粒體腫脹,線粒體嵴斷裂甚至消失。卵泡膜細胞層數(shù)增多,細胞內(nèi)可見到脂滴。

4.血清T濃度非常顯著性增高,血清E?濃度顯著性增高。

參考:

[1]廖寶瑩等, 多囊卵巢綜合征的嚙齒類動物模型. 中華生殖與避孕雜志, 2021. 41(10): 第8頁.

[2]彭洋洋, 張怡與謝青貞, 脫氫表雄酮聯(lián)合高脂飲食誘導建立小鼠多囊卵巢綜合征模型的研究. 生殖醫(yī)學雜志, 2021. 30(12): 第1627-1633頁.



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