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簡(jiǎn)要描述:細(xì)胞原位雜交實(shí)驗(yàn)服務(wù)細(xì)胞原位雜交(Cellular in situ hybridization, ISH)是一種分子生物學(xué)技術(shù),它允許研究者在細(xì)胞或組織的原生環(huán)境中定位和檢測(cè)特定的DNA或RNA序列。這種技術(shù)對(duì)于研究基因表達(dá)模式、基因定位、染色體異常以及病原體檢測(cè)等方面具有重要意義。通過(guò)原位雜交,可以在細(xì)胞層面上獲得關(guān)于核酸分子的定性、定量和定位信息。
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細(xì)胞原位雜交實(shí)驗(yàn)服務(wù)
細(xì)胞原位雜交(Cellular in situ hybridization, ISH)是一種分子生物學(xué)技術(shù),它允許研究者在細(xì)胞或組織的原生環(huán)境中定位和檢測(cè)特定的DNA或RNA序列。這種技術(shù)對(duì)于研究基因表達(dá)模式、基因定位、染色體異常以及病原體檢測(cè)等方面具有重要意義。通過(guò)原位雜交,可以在細(xì)胞層面上獲得關(guān)于核酸分子的定性、定量和定位信息。
實(shí)驗(yàn)的基本步驟和關(guān)鍵技術(shù)要點(diǎn)
細(xì)胞原位雜交實(shí)驗(yàn)服務(wù)通常包括以下步驟:
1.樣本準(zhǔn)備:固定和預(yù)處理細(xì)胞或組織樣本,以保持核酸的完整性和穩(wěn)定性。
2.探針設(shè)計(jì)與標(biāo)記:設(shè)計(jì)與目標(biāo)核酸序列互補(bǔ)的探針,并使用熒光或放射性標(biāo)記。
3.雜交:將標(biāo)記的探針與樣本中的核酸序列進(jìn)行雜交反應(yīng)。
4.洗滌:去除未雜交的探針,以減少背景信號(hào)。
5.檢測(cè):使用熒光顯微鏡或放射自顯影技術(shù)檢測(cè)雜交信號(hào)。
6.結(jié)果分析:分析雜交信號(hào)的位置、數(shù)量和強(qiáng)度,以得出生物學(xué)結(jié)論。
在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,溫度、濕度、光照和試劑的pH值等條件對(duì)雜交效率有顯著影響,需要嚴(yán)格控制。
實(shí)驗(yàn)中的常見(jiàn)問(wèn)題和解決方案
實(shí)驗(yàn)中可能遇到的問(wèn)題包括非特異性雜交、信號(hào)弱或背景高。解決這些問(wèn)題的策略包括優(yōu)化雜交條件、使用高質(zhì)量的探針和嚴(yán)格遵守實(shí)驗(yàn)操作規(guī)程。此外,使用抗淬滅劑可以幫助延長(zhǎng)熒光信號(hào)的穩(wěn)定性。
時(shí)效性信息
根據(jù)最新的信息,熒光原位雜交(Fluorescence in situ hybridization, FISH)技術(shù)仍然是細(xì)胞原位雜交中的一個(gè)重要分支,它利用熒光標(biāo)記的核酸片段進(jìn)行雜交,通過(guò)熒光檢測(cè)系統(tǒng)檢測(cè)信號(hào),適用于染色體的鑒定、基因定位和異常染色體檢測(cè)等領(lǐng)域。FISH技術(shù)的優(yōu)勢(shì)包括安全、快速、靈敏度高,且探針能較長(zhǎng)時(shí)間保存。
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