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實(shí)時(shí)熒光定量PCR實(shí)驗(yàn) (Quantitative Real-time PCR)是一種在DNA擴(kuò)增反應(yīng)中,以熒光化學(xué)物質(zhì)測每次聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)循環(huán)后產(chǎn)物總量的方法。通過內(nèi)參或者外參法對(duì)待測樣品中的特定DNA序列進(jìn)行定量分析的方法。
分子實(shí)驗(yàn)-PCR:普通電泳PCR實(shí)驗(yàn)的原理是DNA分子在電場中會(huì)向正極方向移動(dòng)。不同長度的DNA由于受到凝膠介質(zhì)的阻力不同,表現(xiàn)為不同的遷移率而被分開。
熒光素酶實(shí)驗(yàn)是指以熒光素(luciferin)為底物來檢測螢火蟲熒光素酶(fireflyluciferase)活性的一種報(bào)告系統(tǒng)。熒光素酶可以催化luciferin氧化成oxyluciferin,在luciferin氧化的過程中,會(huì)發(fā)出生物熒光(bioluminescence)。
免疫共沉淀實(shí)驗(yàn)(Co-Immunoprecipitation)是以抗體和抗原之間的專一性作用為基礎(chǔ)的用于研究蛋白質(zhì)相互作用的經(jīng)典方法。是確定兩種蛋白質(zhì)在完整細(xì)胞內(nèi)生理性相互作用的有效方法。
RNA-seq實(shí)驗(yàn),也叫轉(zhuǎn)錄組測序技術(shù),就是把mRNA,smallRNA,and NONcoding RNA等等,其中一些用高通量測序技術(shù)把它們的序列測出來,以此來檢測它們的表達(dá)水平。
過表達(dá)慢病毒構(gòu)建及包裝實(shí)驗(yàn):慢病毒(Lentivirus)載體是以 HIV-1 (人類免疫缺陷1型病毒)為基礎(chǔ)發(fā)展起來的基因治療載體。具有感染譜廣泛、可以有效感染分裂期和靜止期細(xì)胞、長期穩(wěn)定表達(dá)外源基因等優(yōu)點(diǎn),因此成為導(dǎo)入外源基因的有力工具?,F(xiàn)在慢病毒系統(tǒng)已經(jīng)被廣泛應(yīng)用到各種細(xì)胞系的基因過表達(dá)、RNA干擾、microRNA研究以及活體動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中。
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