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每當(dāng)拿到一個(gè)質(zhì)粒圖譜,是不是一下就有點(diǎn)懵了?這些ori、RBS、tet是什么?這些箭頭代表什么,轉(zhuǎn)錄的方向嗎?不要著急,劍鈍生物把這些告訴你,也許會(huì)解決你的困惑。質(zhì)粒和載體傻傻分不清楚質(zhì)粒(Plasmid)是附加到細(xì)胞中的非細(xì)胞的染色體或核區(qū)DNA原有的能夠自主復(fù)制的較小的DNA分子(即細(xì)胞附殖粒、又胞附殖粒)。大部分的質(zhì)粒雖然都是環(huán)狀構(gòu)型。載體即要把一個(gè)有用的基因(目的基因——研究或應(yīng)用基因)通過(guò)基因工程手段送到生物細(xì)胞(受體細(xì)胞),需要運(yùn)載工具(交通工具)攜帶外源基因進(jìn)入...
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大鼠不同程度腦損傷模型(1)復(fù)制方法健康雄性大鼠,體重為230~260g。采用改進(jìn)的Feeney自由落體硬膜外撞擊方法。損傷裝置由底板、固定支架、垂直導(dǎo)桿、下落和聚乙烯撞擊圓錐組成。撞擊圓錐頭端直徑為4mm、高為2.5mm。經(jīng)腹腔注射水合氯醛(按350~400mg/kg體重的劑量)或戊丨巴丨比丨妥丨鈉(按50~60mg/kg體重的劑量)麻醉。將其頭部固定于立體定向儀上,剪去頂部毛發(fā),手術(shù)區(qū)域皮膚消毒。沿中線左側(cè)切開(kāi)頭皮,分離骨膜,用牙科鉆于中線旁2mm、緊挨冠狀縫后開(kāi)一直徑5...
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兔腦血管痙攣模型(1)復(fù)制方法新西蘭兔,雌雄不拘,體重為2.0~2.5kg。1)自體血注入經(jīng)耳緣靜脈注射戊丨巴丨比丨妥丨鈉(按25~30mg/kg體重的劑量)或20%烏拉坦(按5ml/kg體重的劑量)麻醉,左側(cè)臥位固定,剪除手術(shù)區(qū)域毛發(fā),皮膚消毒。切口垂直于顴弓并經(jīng)其中點(diǎn),上達(dá)顳上線,下達(dá)顴弓下0.5cm,一次切開(kāi)直達(dá)顴骨鱗部,鉆孔后擴(kuò)大成窗,充分顯露中顱窩底。剪開(kāi)硬膜,抬起顎葉,吸除腦脊液,使腦葉塌陷。沿蝶骨大翼探至視神經(jīng)處,將塑料導(dǎo)管剪成1.5cm長(zhǎng),管端放在視神經(jīng)外側(cè)。...
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記憶障礙動(dòng)物模型引起動(dòng)物的記憶障礙有多種方法,包括電休克、缺血缺氧、某些化學(xué)藥品等。對(duì)記憶障礙的測(cè)定則采用學(xué)習(xí)記憶的實(shí)驗(yàn)方法。在此先介紹常用的學(xué)習(xí)記憶實(shí)驗(yàn)法。1學(xué)習(xí)、記憶實(shí)驗(yàn)法(learnandmemorytest)人們和動(dòng)物的精神活動(dòng)、心理狀態(tài)都是無(wú)法直接觀察到的。為了研究這些活動(dòng)的發(fā)生過(guò)程,科學(xué)家們只能根據(jù)可觀察到的刺激反應(yīng)進(jìn)行推測(cè)。對(duì)腦內(nèi)記憶過(guò)程的研究只能從人類(lèi)或動(dòng)物學(xué)習(xí)或執(zhí)行某項(xiàng)任務(wù)后間隔時(shí)間,測(cè)量他們的操作成績(jī)或反應(yīng)時(shí)間,由此來(lái)衡量這些過(guò)程的編碼形式、儲(chǔ)存量、保持時(shí)...
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一、服務(wù)簡(jiǎn)介動(dòng)物:大鼠,SPF級(jí),健康,雄性造模方法:1,經(jīng)腹腔注射麻醉大鼠;剃除頭頂部毛發(fā)后固定于腦立體定位以上,手術(shù)區(qū)皮膚消毒,切開(kāi)皮膚,暴露顱骨。2,參照大鼠腦立體定位圖譜(國(guó)內(nèi)多選用包新民的大鼠腦立體定向圖譜),在前后囟2mm、中線外1mm處,用牙科鉆鑿開(kāi)顱骨,切開(kāi)硬腦殼膜,用刀置于上述部位的腦表面,降刀4.5mm,外移1mm,再降刀1mm,外移1.5mm,上下抽動(dòng)刀20次,以*切斷穹隆海馬傘??尚袉蝹?cè),也可行雙側(cè)穹隆海馬傘切除。術(shù)后連續(xù)應(yīng)用頭孢唑啉鈉(50mg/kg...
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1.將水迷宮加入適當(dāng)?shù)乃疁乜刂圃?5±1℃。2.實(shí)驗(yàn)前把動(dòng)物帶入實(shí)驗(yàn)室中熟悉環(huán)境。3.設(shè)置軟件。4.一階段:(定位航行)將小鼠頭對(duì)著墻壁依次放入四個(gè)象限水迷宮進(jìn)行實(shí)驗(yàn)(所有小鼠需全部做完后換下一象限)。若動(dòng)物在60s內(nèi)登上平臺(tái)區(qū)域,則結(jié)束。若動(dòng)物在60s內(nèi)未登上平臺(tái)區(qū)域,則用木棍指引大鼠游上平臺(tái),并停留30s。每只小鼠每天訓(xùn)練4次,訓(xùn)練天數(shù)為4天。5.每只動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)束后需用干毛巾擦拭,必要時(shí)需要使用電吹風(fēng)吹干。6.二階段(空間探索):待一象限到第四象限全部做...
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ELASA:用于檢測(cè)未知抗體的間接法1.用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃過(guò)夜。2.次日洗滌3次。3.加稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí),洗滌。(同時(shí)做空白、陰性及陽(yáng)性孔對(duì)照)于反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.1ml,37℃孵育30-60分鐘,洗滌,后一遍用DDW洗滌。4.加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分鐘。5.終止反應(yīng):于各...
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