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大鼠腦缺血再灌注損傷模型步驟

更新時(shí)間:2021-12-17      點(diǎn)擊次數(shù):1098

大鼠腦缺血再灌注損傷模型

模型:

麻醉大鼠,然后在頸部中線切開(kāi)一個(gè)切口,暴露頸外動(dòng)脈和頸內(nèi)動(dòng)脈,用無(wú)菌縫合線結(jié)扎,血管夾夾住頸內(nèi)動(dòng)脈。隨后在頸總動(dòng)脈上切口,然后插入線栓。2 h后,大鼠進(jìn)行再灌注。模型大鼠成功構(gòu)建的標(biāo)準(zhǔn):大鼠出現(xiàn)癥狀如偏癱,對(duì)側(cè)前肢下垂和站立不穩(wěn)。Bederson評(píng)分在1-3分,48小時(shí)內(nèi)沒(méi)有死亡,就認(rèn)為模型成功。文獻(xiàn)上用的是2-3分的模型。

優(yōu)點(diǎn):

無(wú)需開(kāi)顱,創(chuàng)傷較??;缺血部位相對(duì)固定,可控性好;可實(shí)現(xiàn)腦缺血后再灌注,是理想的標(biāo)準(zhǔn)局灶性腦缺血?jiǎng)游锬P汀?/span>

動(dòng)物選擇:

目前多選用SD大鼠。考慮大鼠雌激素水平對(duì)腦缺血損傷可能的神經(jīng)保護(hù)機(jī)制及激素水平的生理性波動(dòng)對(duì)大鼠情緒的影響,采用血管解剖結(jié)構(gòu)更為清晰的雄性SD大鼠作為MCAO的動(dòng)物模型。

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體重和鼠齡:

大鼠大腦中動(dòng)脈的長(zhǎng)度和粗細(xì)與其體重形成正比,目前多主張大鼠體重控制在250300 g。我們?cè)趯?shí)驗(yàn)中采用240270 g大鼠。

術(shù)后再灌:

選擇缺血后2h再灌注,在大鼠體外傷口縫合處找到線頭,輕輕拔出線栓 23 cm 剪斷,若此時(shí)大鼠已*清醒,可注射少量麻醉后再將線栓拔出,以防拔線栓時(shí)大鼠過(guò)度掙扎加大損傷。

術(shù)后護(hù)理與并發(fā)癥:

術(shù)后將大鼠放回鼠籠、保溫,期間可將大鼠頭部微微墊高,以防側(cè)枝循環(huán)過(guò)快恢復(fù)。

MCAO模型評(píng)價(jià)方法:

神經(jīng)功能評(píng)分、TTC 染色、腦組織含水量、局部腦血流測(cè)定和頭顱磁共振等。

神經(jīng)功能評(píng)分:Bederson 評(píng)分

   0分:無(wú)神經(jīng)損傷癥狀

   1分:懸尾實(shí)驗(yàn)不能*伸展對(duì)側(cè)前爪

   2分:前肢抵抗對(duì)側(cè)推力能力下降

   3分:向?qū)?cè)轉(zhuǎn)圈

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注意事項(xiàng):

00001. 線栓插入深度為從頸總動(dòng)脈分叉處插入約 18 mm,即將線栓送入頸內(nèi)動(dòng)脈后,黑色標(biāo)記點(diǎn)過(guò)分叉點(diǎn)約 1 mm,感覺(jué)稍有阻力時(shí)即停止插入。

00002. 線栓插入位置和走向:頸總動(dòng)脈插入。結(jié)扎頸總動(dòng)脈近心端,遠(yuǎn)心端掛線備用,結(jié)扎頸外動(dòng)脈,頸內(nèi)動(dòng)脈系活結(jié)或動(dòng)脈夾夾住。



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