染色原理:
所謂三色染色通常是指染胞核和能選擇性的顯示膠原纖維和肌纖維。該法染色原理不陰離子染料分子的大小和組織的滲透有關(guān):分子的大小由分子量來(lái)體現(xiàn),小分子量易穿透結(jié)構(gòu)致密、滲透性低的組織;而大分子量則只能進(jìn)入結(jié)構(gòu)疏松的、滲透性高的組織。然而,淡綠或苯胺藍(lán)的分子量都很大,因此Masson染色后肌纖維呈紅色,膠原纖維呈綠色(淡綠)或藍(lán)色(苯胺藍(lán)),主要用于區(qū)分膠原纖維和肌纖維。
Masson染色特點(diǎn):
1、染色穩(wěn)定
2、分化時(shí)間短,1~2s
3、色彩清晰鮮艷
4、適用范圍廣,適宜于組織的石蠟切片、冰凍切片等染色
5、所染切片保存時(shí)間長(zhǎng)且不易褪色
Masson染色步驟
1、切片常規(guī)脫蠟至水,用配制好的Weigert鐵蘇木素染色5~10min。
2、用酸性乙醇分化液分化,水洗。
3、用Masson藍(lán)化液返藍(lán),水洗。
4、蒸餾水洗1min。
5、麗春紅品紅染色液染色5~10min。
6、在上述操作過(guò)程中按蒸餾水:弱酸溶液=2:1比例配制弱酸工作液,用弱酸工作液洗1min。
7、磷鉬酸溶液洗1~2min。
8、用配制好的弱酸工作液洗1min。
9、直接入苯胺藍(lán)染色液中染色1~2min。
10、用配制好的弱酸工作液洗1min。
11、95%乙醇快速脫水。無(wú)水乙醇脫水3次,每次5~10s。
12、二甲苯透明3次,每次1~2min。中性樹(shù)膠封固。
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