1. 對于貼壁細(xì)胞或細(xì)胞涂片PBS洗滌一次。
2. 如果細(xì)胞貼得不牢,可以干燥樣品使細(xì)胞貼得更牢。
3. 用4%多聚甲醛固定細(xì)胞15分鐘,用PBS洗滌一次。
4. 將切片移入濕盒中加入新鮮配制的3%雙氧水,以去除內(nèi)源性過氧化物酶封閉液,室溫孵育10分鐘,PBS充分淋洗;
5. 滴加正常山羊血清封閉液,室溫30分鐘,甩去多余液體;
6. 滴加一抗工作液,37℃孵育2h(或4℃過夜),然后PBS充分淋洗;
7. 滴加兔/鼠二抗工作液,室溫孵育1h,PBS充分淋洗;
8. DAB顯色5-10分鐘,在顯微鏡下掌握染色程度 ;
9. PBS或自來水沖洗1分鐘 ;
10. 蘇木精復(fù)染3分鐘,鹽酸酒精分化,反藍(lán);
11. 自來水沖洗1分鐘 脫水、透明、封片、鏡檢。
歡迎您關(guān)注我們的微信公眾號了解更多信息