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藥物半數(shù)致死量LD50的測(cè)定實(shí)驗(yàn)

更新時(shí)間:2022-04-30      點(diǎn)擊次數(shù):2841

實(shí)驗(yàn)方法原理

藥物半數(shù)致死量LD50是指藥物急性毒性實(shí)驗(yàn)中,當(dāng)動(dòng)物死亡率為50%時(shí)的單次給藥劑量,單位通常為mg/kg。例如,當(dāng)某藥物給予400mg劑量時(shí),可致使一半家兔(體重約為4kg)死亡,則其LD50值為100mg/kg。LD50值

 

通常反映藥物急性毒性的大小。藥物的急性毒性、慢性毒性實(shí)驗(yàn)同屬于一般毒理學(xué)的研究范疇。此外,藥物毒理學(xué)研究尚包括特殊毒理學(xué)(致癌、致畸、致突變)、藥物依賴性及過敏反應(yīng)實(shí)驗(yàn)等。各種屬動(dòng)物均可用于藥物

 

LD50值的測(cè)定,通常使用嚙齒類動(dòng)物(大鼠和小鼠),有時(shí)使用家兔和犬。


(barbiturate)藥物可抑制中樞神經(jīng)系統(tǒng),引起鎮(zhèn)靜、催眠、抗驚厥及麻醉作用,當(dāng)劑量過大時(shí)可使生命中樞麻痹,最終導(dǎo)致死亡。本實(shí)驗(yàn)通過學(xué)習(xí)測(cè)定麻醉劑的LD50值,介紹了藥物急性毒性的研究方法。

實(shí)驗(yàn)材料

 

小鼠(昆明種) 雌雄各半

 

儀器、耗材

 麻醉劑溶液 生理鹽水量筒 燒杯 注射器 天平

 

實(shí)驗(yàn)步驟

 

1. 預(yù)實(shí)驗(yàn)


隨機(jī)將小鼠分為4~5組,每組3~4只。配制3%麻醉原液,可進(jìn)一步稀釋為不同濃度藥液。小鼠腹腔注射給藥,各組給藥劑量按照等比數(shù)列遞減。記錄每組動(dòng)物的死亡率。目的在于找到并確定造成0%與100%動(dòng)物死

 

亡的劑量范圍。


2. 正式實(shí)驗(yàn)



(1)先將小鼠雌雄分開,逐一稱重。雌、雄小鼠分別按照體重由小到大(或由大到小)排序。然后按照分層隨機(jī)原則將小鼠分為5~7組,每組10只。



(2)根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)中造成0%與100%動(dòng)物死亡的劑量范圍,在其間設(shè)計(jì)5~7個(gè)不同劑量組,使劑量按照等比數(shù)列遞減。給藥后觀察并記錄動(dòng)物的死亡時(shí)間和數(shù)目。連續(xù)觀察7~14天。按照簡(jiǎn)化概率法、改進(jìn)寇氏法、Bliss法

 

(詳見參考書目)計(jì)算LD50值及其95%可信區(qū)間。



(3)計(jì)其方法(寇氏法):

注意事項(xiàng)

 

1. 正式實(shí)驗(yàn)中,根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)中0%與100%動(dòng)物死亡的劑量范圍,按照等比數(shù)列設(shè)計(jì)5~7個(gè)不同劑量組,公比一般取1: 0.8 ~ 1: 0.7。


2. LD50值計(jì)算方法很多,其中Bliss法亦稱作加權(quán)幾率單位法或幾率單位正規(guī)法,是目前新藥審批中規(guī)定使用的方法?,F(xiàn)可通過統(tǒng)計(jì)軟件計(jì)算完成,如中國(guó)藥理學(xué)會(huì)數(shù)學(xué)藥理專業(yè)委員會(huì)編制的藥效學(xué)統(tǒng)計(jì)軟件。


3. 若同時(shí)測(cè)定藥物的LD50值及ED50值(半數(shù)有效劑量),可計(jì)算藥物治療指數(shù)TI(therapeutic index),即TI= ED50/LD50。通常來說,藥物治療指數(shù)越大,則越安全。


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