欲色AV无码一区二区人妻,高H小月被几个老头调教,精品伦理一区二区三区,成人伊人青草久久综合网

咨詢熱線

18017847121

當(dāng)前位置:首頁  >  技術(shù)文章  >  大鼠骨髓來源的內(nèi)皮祖細(xì)胞體外培養(yǎng)方法

大鼠骨髓來源的內(nèi)皮祖細(xì)胞體外培養(yǎng)方法

更新時間:2024-03-28      點擊次數(shù):381

1. SD大鼠,250g,通過頸椎脫位處死大鼠,浸入75%乙醇浸泡5分鐘,轉(zhuǎn)移到通風(fēng)柜中的解剖盤中。

2. 打開皮膚,暴露、收集股骨,無菌狀態(tài)下移除附著的肌肉和組織。

3. 并轉(zhuǎn)移股骨至預(yù)冷含雙抗的PBS中,洗滌三次。冰上操作。

4. 切斷股骨骨骺, 使用5mlPBS,1ml注射器針頭沖洗,沖洗液由棕色變成粉紅色即可(股骨變白)。沖洗后,用1ml注射器吹打3-5次。

5. 70um濾網(wǎng)過濾,棄去篩網(wǎng)。使用 15ml 離心管,先加入分離液,然后緩慢加入濾過的懸液。20℃環(huán)境下,600g 離心 25min

6. 離心后,離心管中液體由上至下分為四層。第一層為稀釋液層。第二層為環(huán)狀乳白色單個核細(xì)胞層。第三層為透明分離液層。第四層為紅細(xì)胞層。

7. 小心吸取離心管中的,環(huán)狀乳白色單個核細(xì)胞層,轉(zhuǎn)移到新離心管中,加入 5-10ml 洗滌液,混勻細(xì)胞。400g,離心 10min。

8. 棄去上清,用吸管吸取 5ml 清洗液重懸所得細(xì)胞。 250g,離心 10min,棄去上清。 再用M199完丨全培養(yǎng)基(10 ng/mL VEGF,1 ng/mL b-FGF,1 ng/mL EGF,20%胎牛血清、1%雙抗清洗一次,棄去上清,M199完丨全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。250g,離心 10min,棄去上清。M199完丨全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,計數(shù)。

9. 3×106/孔種入纖連蛋白包被過的24孔板,每3天換一次培養(yǎng)基,以去除非貼壁細(xì)胞,持續(xù)誘導(dǎo)培養(yǎng)2-3周。


上海達為科生物科技有限公司
  • 聯(lián)系人:張
  • 地址:上海市長江南路180號長江軟件園B區(qū)B637室
  • 郵箱:2844970554@qq.com
  • 傳真:
關(guān)注我們

歡迎您關(guān)注我們的微信公眾號了解更多信息

掃一掃
關(guān)注我們
版權(quán)所有©2024上海達為科生物科技有限公司All Rights Reserved    備案號:滬ICP備15041491號-2    sitemap.xml    總流量:115714
管理登陸    技術(shù)支持:化工儀器網(wǎng)    
桦川县| 怀宁县| 佳木斯市| 沙河市| 佛学| 新密市| 香河县| 内黄县| 云霄县| 叙永县| 西贡区| 汶川县| 兴义市| 九龙坡区| 郓城县| 齐齐哈尔市| 武义县| 河东区| 宜州市| 安庆市| 黎平县| 万荣县| 武鸣县| 图片| 崇仁县| 嘉峪关市| 安徽省| 慈利县| 西贡区| 鹿泉市| 嘉荫县| 乡城县| 千阳县| 斗六市| 专栏| 桃园市| 哈密市| 巴东县| 定远县| 西贡区| 福泉市|