本次會(huì)議,主要針對(duì)成年小鼠心肌細(xì)胞分離培養(yǎng),就以下內(nèi)容展開(kāi)了交流:
分離和培養(yǎng)成年心肌細(xì)胞對(duì)于研究心肌細(xì)胞收縮性、心肌肥厚和心力衰竭非常重要。成年小鼠心肌細(xì)胞之間通過(guò)閏盤(pán)牢固連接,因而與新生小鼠心肌細(xì)胞分離相比,成年小鼠心肌細(xì)胞分離非常具有挑戰(zhàn)性。我們自建了一套灌流體系,能夠很好的完成成年小鼠的心肌細(xì)胞的分離,用過(guò)鈣離子處理后,分離的成年小鼠心肌細(xì)胞可用于廣泛的實(shí)驗(yàn),包括藥物篩選。
改良的分離方法:有研究團(tuán)隊(duì)提出了一種改良的成年小鼠心室肌細(xì)胞分離方法,這種方法采用心臟在體主動(dòng)脈插管,結(jié)合前加壓灌流法和倒置灌流排氣法,可以提高心肌細(xì)胞的收獲量和存活率。這種方法還利用了實(shí)驗(yàn)室常規(guī)眼科鑷和血管鉗巧妙組合成的協(xié)助裝置,可以單人獨(dú)立完成插管,節(jié)約人力和經(jīng)費(fèi)開(kāi)支。
急性提取方法:另一種方法是通過(guò)酶解法快速提取成年小鼠心肌細(xì)胞,這種方法簡(jiǎn)單、快速,可以獲得大量的高質(zhì)量的心肌細(xì)胞,且細(xì)胞存活率不低于90%。
優(yōu)化的Langendorff灌注系統(tǒng):Langendorff灌注系統(tǒng)是一種常用的心臟灌注方法,通過(guò)優(yōu)化該系統(tǒng),研究者可以獲得具有高活力和純度的心肌細(xì)胞,這種優(yōu)化包括去除氣泡的新方法和標(biāo)準(zhǔn)化終止消化的標(biāo)準(zhǔn)。
商業(yè)化的培養(yǎng)試劑盒:市面上也有商業(yè)化的小鼠心肌細(xì)胞分離培養(yǎng)試劑盒,這些試劑盒提供了一系列的試劑和指導(dǎo)手冊(cè),有助于研究者更高效地獲得目的細(xì)胞,并確保培養(yǎng)的細(xì)胞具有可靠性和重復(fù)性。
本次會(huì)議,提升公司對(duì)成年小鼠心肌細(xì)胞分離培養(yǎng)的重要知識(shí)點(diǎn)的認(rèn)知。
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