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簡要描述:藥物對細胞影響實驗是上海達為科生物的基礎(chǔ)服務(wù)項目之一,由細胞平臺經(jīng)驗豐富的實驗人員操作完成。
詳細介紹
細胞毒性檢測主要是根據(jù)細胞膜通透性發(fā)生改變來進行的檢測,常用以下幾種方法:
MTT、XTT法:利用線粒體內(nèi)部酶的活性,可以將特定的四唑鹽類進行轉(zhuǎn)化,然后通過酶標(biāo)儀進行檢測
LDH的方法:通過檢測細胞培養(yǎng)上清中LDH的酶活性,來檢測細胞毒性
其它酶方法:如檢測上清中堿性磷酸酶、酸性磷酸酶的活性等
細胞增殖能力分析試劑盒
原理:正常細胞代謝旺盛,其線粒體內(nèi)的琥珀酸脫氫酶,可將四唑鹽類物質(zhì)(如 MTT、XTT、WST-1等 )還原為紫色的結(jié)晶狀的物質(zhì),沉積在細胞周圍,然后通過酶標(biāo)儀讀取OD值,從而檢測到細胞增值狀態(tài)
熒光素發(fā)光法細胞生存能力檢測
原理:腺苷酸激酶(AK)存在于所有真核和原核細胞的胞漿中,AK具有激活A(yù)DP生成ATP。當(dāng)細胞受損后,細胞膜發(fā)生破損,AK會釋放到培養(yǎng)上清中。該試劑盒利用熒光素酶和熒光素在ATP作用下可以發(fā)光,通過化學(xué)發(fā)光儀可以定量進行檢測。
LDH法細胞毒性檢測
原理:LDH(乳酸脫氫酶)是一種穩(wěn)定的蛋白質(zhì),存在于正常細胞的胞質(zhì)中,一旦細胞膜受損,LDH即被釋放到細胞外; LDH催化乳酸形成丙酮酸鹽,和INT(四唑鹽類)反應(yīng)形成紫色的結(jié)晶物質(zhì),可通過500nm酶標(biāo)儀進行檢測。通過檢測細胞培養(yǎng)上清中LDH的活性,可判斷細胞受損的程度
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