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細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)

簡(jiǎn)要描述:細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn):細(xì)胞毒性(cytotoxic)是由細(xì)胞或化學(xué)物質(zhì)引起的單純細(xì)胞殺傷事件,不依賴于凋亡或壞死的細(xì)胞死亡機(jī)理。有時(shí)需要進(jìn)行特定物質(zhì)細(xì)胞毒性的檢測(cè),比如藥物篩選。

  • 更新時(shí)間:2022-12-23
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細(xì)胞毒性檢測(cè)主要是根據(jù)細(xì)胞膜通透性發(fā)生改變來(lái)進(jìn)行的檢測(cè),常用以下幾種方法:
MTT、XTT法:利用線粒體內(nèi)部酶的活性,可以將特定的四唑鹽類進(jìn)行轉(zhuǎn)化,然后通過(guò)酶標(biāo)儀進(jìn)行檢測(cè)
LDH的方法:通過(guò)檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)上清中LDH的酶活性,來(lái)檢測(cè)細(xì)胞毒性
其它酶方法:如檢測(cè)上清中堿性磷酸酶、酸性磷酸酶的活性等
細(xì)胞增殖能力分析試劑盒
原理:正常細(xì)胞代謝旺盛,其線粒體內(nèi)的琥珀酸脫氫酶,可將四唑鹽類物質(zhì)(如 MTT、XTT、WST-1等 )還原為紫色的結(jié)晶狀的物質(zhì),沉積在細(xì)胞周?chē)?,然后通過(guò)酶標(biāo)儀讀取OD值,從而檢測(cè)到細(xì)胞增值狀態(tài)
熒光素發(fā)光法細(xì)胞生存能力檢測(cè)
原理:腺苷酸激酶(AK)存在于所有真核和原核細(xì)胞的胞漿中,AK具有激活A(yù)DP生成ATP。當(dāng)細(xì)胞受損后,細(xì)胞膜發(fā)生破損,AK會(huì)釋放到培養(yǎng)上清中。該試劑盒利用熒光素酶和熒光素在ATP作用下可以發(fā)光,通過(guò)化學(xué)發(fā)光儀可以定量進(jìn)行檢測(cè)。
LDH法細(xì)胞毒性檢測(cè)
原理:LDH(乳酸脫氫酶)是一種穩(wěn)定的蛋白質(zhì),存在于正常細(xì)胞的胞質(zhì)中,一旦細(xì)胞膜受損,LDH即被釋放到細(xì)胞外; LDH催化乳酸形成丙酮酸鹽,和INT(四唑鹽類)反應(yīng)形成紫色的結(jié)晶物質(zhì),可通過(guò)500nm酶標(biāo)儀進(jìn)行檢測(cè)。通過(guò)檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)上清中LDH的活性,可判斷細(xì)胞受損的程度
 

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