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細(xì)胞ROS檢測(cè)實(shí)驗(yàn)

簡(jiǎn)要描述:細(xì)胞ROS檢測(cè)實(shí)驗(yàn)是達(dá)為科生物的基礎(chǔ)服務(wù)項(xiàng)目之一,由細(xì)胞平臺(tái)經(jīng)驗(yàn)豐富的實(shí)驗(yàn)人員操作完成。

  • 更新時(shí)間:2022-12-23
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詳細(xì)介紹

自由基(free radicals),是指帶不成對(duì)電子的原子、分子、離子或原子團(tuán)。自由基的種類(lèi)很多,如以氧(O)、碳(C)、氮(N)為中心的活性基團(tuán)?;钚匝踝?reactive oxygen species, ROS)是生物體內(nèi)一些氧化反應(yīng)中形成的氧自由基,常見(jiàn)有超氧化陰離子(O2-),過(guò)氧化氫(H2O2),過(guò)氧化自由基(ROO-)和氫氧自由基(OH-)等形式。自由基外層具有非配對(duì)電子,其化學(xué)性質(zhì)非?;顫?,它既是電子供體,又是電子受體。

活性氧是生命活動(dòng)中*的活性物質(zhì)。自由基在體內(nèi)可提高一些酶的活性,如核苷酸的合成和肝臟的解毒過(guò)程中,自由基可激活某些合成酶或解毒酶。自由基還參與機(jī)體內(nèi)一些活性物質(zhì)如前列腺素的合成。炎癥過(guò)程中,自由基可促進(jìn)炎性細(xì)胞吞噬細(xì)菌和殺死細(xì)菌,如中性粒細(xì)胞發(fā)生呼吸爆發(fā)時(shí)產(chǎn)生大量自由基,可殺死病原體。

ROS更多被賦予明確的病理意義。ROS可對(duì)細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)、核酸和蛋白分子產(chǎn)生氧化作用,引起其結(jié)構(gòu)和功能障礙。ROS增多導(dǎo)致機(jī)體氧化應(yīng)激反應(yīng)(Oxidative Stress)造成細(xì)胞損傷,參與多種病理機(jī)制。百種以上的疾病狀態(tài)都可能有ROS的參與。

機(jī)體通過(guò)一系列抗氧化機(jī)制,維持ROS的平衡,如超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase, SOD)、過(guò)氧化氫酶(Catalase)等酶類(lèi)和一些小分子還原物質(zhì),可去除細(xì)胞生成的ROS。

檢測(cè)細(xì)胞ROS的含量,可以了解ROS在細(xì)胞一些生理和病理狀態(tài)中的變化,分析藥物效應(yīng)和相關(guān)機(jī)制。由于ROS在體內(nèi)存在的半衰期很短,僅為15秒左右,需要用敏感的方法對(duì)其進(jìn)行檢測(cè)。常用的ROS測(cè)定方法包括luminol及其它化合物與氧自由基的化學(xué)發(fā)光反應(yīng)、ROS的電子自旋共振(electron spin resonance, ESR)測(cè)定,和自由基反應(yīng)性熒光染料的測(cè)定方法。

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