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細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)

更新時(shí)間:2022-02-18      點(diǎn)擊次數(shù):855

材料:

      6孔板

      marker筆

      直尺

      20微升槍頭(滅菌)

      無(wú)血清培養(yǎng)基

      PBS

 

準(zhǔn)備:

      所有能滅菌的器械都要滅菌,直尺和marker筆在操作前紫外照射30min(超凈臺(tái)內(nèi))

流程:

      1、先用marker筆在6孔板背后,用直尺比著,均勻地劃?rùn)M線,大約每隔0.5~1cm一道,橫穿過(guò)孔。每孔至少穿過(guò)5條線。

      2、在空中加入約5X105個(gè)細(xì)胞,具體數(shù)量因細(xì)胞不同而不同,掌握為過(guò)夜能鋪滿。

      3、第二天用槍頭比著直尺,盡量垂直于背后的橫線劃痕,槍頭要垂直,不要傾斜。

      4、用PBS洗細(xì)胞3次,去除劃下的細(xì)胞,加入無(wú)血清培養(yǎng)基。

      5、放入37℃5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。按0、6、12、24小時(shí)取樣,拍照。


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