人胃癌高轉移模型的建立可以:(1)研究腫瘤轉移機制;(2)研究腫瘤防治;(3)為腫瘤轉移研究提供更為理想的動物模型。
腫瘤組織塊原位移植法
實驗方法原理
用人胃癌組織塊SGC-7901 原位移植于SCID小鼠,第4周末移植瘤向淋巴結和肝臟等器官轉移, 轉移率達66. 7% (2/3) ,第6 周末轉移率高達* (10/ 10) 。
實驗材料
雄性SPF級SCID小鼠人胃癌組織SGC-7901
試劑、試劑盒
水合氯醛福爾馬林液
儀器、耗材
飼養(yǎng)籠光學顯微鏡石蠟
實驗步驟
一、實驗材料準備
1. 雄性SPF 級SCID 小鼠,6~7 周齡, 體重20~25g 。
2. 裸小鼠皮下傳代的人胃癌組織( SGC-7901,低分化腺癌) 。
二、胃癌高轉移模型建立
1. SCID 小鼠25 只, 隨機分為試驗組( n= 15) 和正常對照組( n= 10) 。
2. 試驗組動物原位移植人胃癌組織SGC-7901:用4. 3%水合氯醛將動物麻醉后,依次切開左上腹皮膚、腹壁和腹膜, 仔細暴露胃壁,在胃大彎中部用剪刀損傷胃漿膜層( 直徑約3 mm),用絲線將人胃癌組織塊( 約5 mm×7 mm,重量為150 mg ) 縫在損傷處,然后將胃送入腹腔內(nèi), 用0 號縫線依次縫合腹壁和皮膚。
3. 術后觀察動物麻醉情況,直至全部動物清醒后,送至飼養(yǎng)室。
4. 正常對照組不作處理。
5. 手術后第2、4、6 周末分別隨機處死試驗組動物2、3、2 只, 發(fā)現(xiàn)第6 周末2 只動物的癌腫均已轉移,故余下8 只SCID 小鼠也于第6 周末處死。
6. 取胃局部生長的腫瘤組織、腫大淋巴結、腦, 及胸腔、腹腔內(nèi)臟器, 以10% 福爾馬林液固定,石蠟包埋,常規(guī)制片,HE 染色,光學顯微鏡下觀察并記錄腫瘤生長和轉移情況。
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