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簡要描述:乳腺癌動物模型構(gòu)建:乳腺癌是女性常見的惡性腫瘤之一,發(fā)病率逐年上升,隨著人們對乳腺癌的認(rèn)識加深和生活質(zhì)量提高,其預(yù)防和研究工作已經(jīng)成為重中之重。乳腺癌是發(fā)生在乳腺上皮組織的惡性腫瘤。中國乳腺癌新發(fā)病率,一直逐年遞增,嚴(yán)重威脅著女性身心健康。乳腺癌動物模型能夠模擬出人體乳腺癌的病程發(fā)生發(fā)展,在研究乳腺癌發(fā)病機(jī)制和臨床治療中十分重要
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乳腺癌動物模型構(gòu)建是基爾頓實驗組成之一,該實驗由從事動物實驗專業(yè),經(jīng)驗豐富的人員進(jìn)行操作。
乳腺癌動物模型構(gòu)件根據(jù)腫瘤發(fā)生原理,主要分為四種:
1. 自發(fā)型乳腺癌動物模型(很少使用)
實驗動物未經(jīng)任何有意識的人工處理,自然發(fā)生乳腺癌。多采用近交系小鼠,如C3H、SHN小鼠,生長到一定年齡便自然發(fā)生乳腺癌腫瘤。此動物模型更貼近人類腫瘤的發(fā)展,但構(gòu)建時間長,誤差大,一般不建議使用等。
2. 誘發(fā)型乳腺癌動物模型(較少使用)
使用化學(xué)物質(zhì)、物理、生物因素通過經(jīng)口、涂抹、注射等方法應(yīng)用實驗動物,使之發(fā)生乳腺癌。常見化學(xué)誘導(dǎo)方式是以(DMBA)和甲基亞硝酸基脲(MNU)為誘導(dǎo)劑誘發(fā)乳腺癌。
這種方法誘發(fā)成瘤率較高,但誘癌過程較長,個體差異較大,不易同時獲得病程或者腫瘤大小均一的動物模型,不利于應(yīng)用于抗腫瘤藥物的篩選研究。
以DMBA誘導(dǎo)大鼠乳腺癌模型為例:
取7周齡的健康雌性SD,根據(jù)體重將80mg/kg DMBA稀釋在0.5ml玉米油中,灌胃一次,12周后,可建立乳腺癌病變動物模型。
3. 移植型乳腺癌動物模型(易構(gòu)建)
定義:將人體或者其它種屬的動物腫瘤組織或者細(xì)胞移植到免疫缺陷動物身上使其生長成腫瘤的動物模型。
優(yōu)點:周期短,成本低,個體差異小,無自發(fā)緩解,成瘤率高等,目前實驗室應(yīng)用非常多。
分類:
根據(jù)移植對象可分為腫瘤組織接種、組織塊懸液注射、細(xì)胞懸液注射;
根據(jù)移植物來源可分為同種移植和異種移植,其中異種移植需移植于免疫缺陷小鼠中,常用的是T細(xì)胞免疫功能缺陷的裸鼠或者T、B細(xì)胞免疫功能嚴(yán)重缺陷的嚴(yán)重聯(lián)合免疫缺陷(D)小鼠;
根據(jù)移植部位可分為原位移植和異位移植,其中異位移植按照實驗?zāi)康牟煌?,可分為皮下移植、檢測肺轉(zhuǎn)移的尾靜脈注射、檢測骨和腦轉(zhuǎn)移的左心室注射等。
轉(zhuǎn)基因型乳腺癌動物模型(根據(jù)研究需要選擇) 定義:主要是利用基因編輯技術(shù)如CRISPR/Cas9進(jìn)行敲除或插入特定基因,從而誘發(fā)動物產(chǎn)生腫瘤的模型。此模型具有穩(wěn)定的高發(fā)病率,便于觀察,已成為研究乳腺癌發(fā)病機(jī)理的良好的動物模型。目前研究較多的是乳腺特異的啟動子,如在鼠乳腺腫瘤病毒長末端重復(fù)啟動子(MMTV-LTR)的作用下表達(dá)癌基因。 MMTV是導(dǎo)致小鼠乳腺腫瘤的重要病毒,而是利用其病毒組織特異啟動子及增強(qiáng)子功能非(致癌特性),介導(dǎo)癌基因ERBB2、PyMT、Wnt-1在小鼠乳腺高表達(dá)而發(fā)生乳腺癌。除外常用的有:抑癌基因Tp53敲除小鼠、乳腺癌抑制基因(BRCA)敲除小鼠等。以MMTV-PyMT轉(zhuǎn)基因乳腺癌模型為例,乳腺癌相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子Runx1隨著病程發(fā)展而表達(dá)上升。
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