簡要描述:阿爾茨海默病動物模型:阿爾茨海默?。ˋlzheimer's disease,AD)是一種神經退行性疾病,其臨床表現主要是隨著年齡增長,學習能力逐漸低下及行為、表達能力等出現障礙。模擬AD疾病病理發(fā)展的動物模型是研究此疾病的必要工具。
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動物類型:昆明小鼠
造模試劑(1):Aβ25-35
造模方法:小鼠經腹腔注射麻醉,固定于腦立體定位儀,暴露前鹵,參照腦立體定位圖譜,每只小鼠右側腦室注射3μl Aβ25-35(2μg/μl)。坐標為前鹵后1.2mm,矢狀縫右側旁開1.2mm,即為側腦室的體表部位,進針深度為顱骨表面向下3.2mm;注射時進針1μl/min,注射后留針8min,拔針時速度為1mm/min。
造模試劑(2):AlCl3
造模方法:小鼠右側腦室內注射3μl AlCl3(2.5%),注射坐標方法同上。
造模試劑(3):海馬物理損傷
造模方法:小鼠固定于腦立體定位儀,坐標為前鹵后2.4mm,矢狀縫右旁開2.0mm,使用自制首端彎曲的9號針頭垂直插入兩側海馬,順時針轉一周,進針深度為顱骨表面向下3mm。
直接購買AD轉基因小鼠(4)
轉基因模型可分為:APP轉基因模型,PS-1轉基因模型,ApoE4轉基因模型,tau蛋白轉基因模型,雙重和三重轉基因模型
造模方法:各轉基因動物AD模型制作方法和原理基本相同,以APP轉基因動物模型為例:
從人類cDNA文庫可獲取h-APP基因cDNA可表達片段,在5’端連接合適的啟動子,3’端連接SV40及其PolyA尾既構成外源h-APP基因。H-APP基因經體外擴增,裂解純化去除質粒序列后,通過一定的方法直接注入小鼠受精卵或早期胚胎細胞核內使之穩(wěn)定地整合于染色體內,將該受精卵或胚胎細胞植入假孕母*宮或輸卵管內發(fā)育成熟,即可獲得穩(wěn)定表達外源h-APP基因的基因鼠。
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