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簡(jiǎn)要描述:動(dòng)物肢體缺血模型構(gòu)建是實(shí)驗(yàn)平臺(tái)組成之一,該實(shí)驗(yàn)由從事動(dòng)物實(shí)驗(yàn)專業(yè),經(jīng)驗(yàn)豐富的人員進(jìn)行操作。
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肢體缺血?jiǎng)游锬P褪沁M(jìn)行缺血損傷機(jī)制、血管新生等研究的基礎(chǔ),成功制作一種效果確切、重復(fù)性強(qiáng)的肢體缺血模型是保證實(shí)驗(yàn)研究能夠順利進(jìn)行的關(guān)鍵。當(dāng)前缺血性疾病患者日漸增多,以糖尿病肢體動(dòng)脈閉塞癥(DAO)、閉塞性動(dòng)脈硬化癥(ASO)和血栓閉塞性脈管炎(TAO)為主的下肢缺血性疾病發(fā)病率逐年增加。國(guó)外資料顯示,70歲以上老年人群中僅動(dòng)脈硬化閉塞癥患病率即可達(dá)15%~20%。而患病人群范圍可覆蓋至青壯年,其高發(fā)生率和廣泛累及率已嚴(yán)重危害著人們的身心健康和生存質(zhì)量,亟待探索其發(fā)生機(jī)制、預(yù)防措施及治療方法。建立缺血?jiǎng)游锬P褪情_展缺血性疾病研究的一種有效途徑。通過對(duì)動(dòng)物模型的在體研究,有助于闡明缺血性疾病的病變機(jī)制、發(fā)展過程,篩選出有特異性治療作用的藥物及方法。近年來,通過建立動(dòng)物后肢缺血模型進(jìn)行血管新生、基因療法和干細(xì)胞移植等研究已成為現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中的研究熱點(diǎn)。綜合國(guó)內(nèi)外研究資料可見,肢體缺血模型適用于急性缺血、慢性持續(xù)性缺血、肢體缺血再灌注以及缺血預(yù)處理等幾方面的研究。因此,如何根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康恼_選擇肢體缺血模型的制作方法,以及如何對(duì)該模型的缺血效果進(jìn)行評(píng)價(jià),從而制作出效果確實(shí)可靠、穩(wěn)定性良好的肢體缺血模型顯得尤為重要。有學(xué)者根據(jù)缺血效果將缺血?jiǎng)游锬P涂偨Y(jié)為暫時(shí)缺血和永遠(yuǎn)缺血兩大類,本研究現(xiàn)對(duì)這兩類肢體缺血模型的建立、應(yīng)用和評(píng)價(jià)作一總結(jié),以期為該模型的相關(guān)研究應(yīng)用提供參考。
模型制作
暫時(shí)缺血模型
暫時(shí)缺血模型包括肢體缺血再灌注損傷模型以及缺血預(yù)處理模型,適用于肢體缺血再灌注損傷的防治、肢體遠(yuǎn)距缺血預(yù)處理和肢體遠(yuǎn)距缺血后適應(yīng)的研究。暫時(shí)缺血模型制作方法分為肢體環(huán)扎法和暫時(shí)阻斷動(dòng)脈法兩種。肢體環(huán)扎法是外用繃帶、止血帶或橡皮筋等物質(zhì)環(huán)扎于動(dòng)物單側(cè)或雙側(cè)肢體根部,一段時(shí)間后放開,以此達(dá)到暫時(shí)缺血的目的。環(huán)扎時(shí)間視研究目的而異,缺血再灌注損傷一般為4 h左右,而肢體缺血后適應(yīng)或肢體遠(yuǎn)距預(yù)處理多為5 min,并反復(fù)多次進(jìn)行。肢體環(huán)扎法具有無創(chuàng)性,對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的損傷較小。暫時(shí)阻斷動(dòng)脈法通過手術(shù)分離實(shí)驗(yàn)動(dòng)物某側(cè)局部供血?jiǎng)用},用血管夾暫時(shí)夾閉血流,3h(及以上)后撤夾恢復(fù)血流灌注,其效果比肢體環(huán)扎法可靠,但對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的損傷較大。Messina 等將兩種方法相結(jié)合使用,以加強(qiáng)肢體的急性缺血程度,其效果較單純環(huán)扎或單純夾閉血管要好。大體上看,暫時(shí)缺血模型的建立方法簡(jiǎn)便、易行,效果能夠令人滿意,基本上可以符合實(shí)驗(yàn)要求。
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