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磁珠分選細胞實驗

簡要描述:磁珠分選細胞實驗步驟

磁珠分選是一種常用的細胞分離技術(shù),特別適用于免疫細胞的純化。

  • 更新時間:2024-10-14
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詳細介紹

磁珠分選細胞實驗步驟

磁珠分選是一種常用的細胞分離技術(shù),特別適用于免疫細胞的純化。


以下是基于最新信息的磁珠分選細胞實驗步驟:

  

1.樣本準(zhǔn)備:

  1.1使用抗凝劑處理外周血液樣本,并通過密度梯度離心法分離出PBMC(外周血單個核細胞)。

  1.2如果處理組織樣本,需要將組織切碎并消化以制備單細胞懸浮液。

  

2.磁珠標(biāo)記:

  2.1計算細胞數(shù)量,并根據(jù)需要添加適量的磁珠。例如,對于每1億細胞,可能需要添加一定體積的磁珠。

  2.2將磁珠與細胞懸液混合,輕輕混勻后在冰上孵育,以促進磁珠與目標(biāo)細胞表面標(biāo)志物的結(jié)合。

  

3.磁性分選:

  3.1將磁珠標(biāo)記的細胞懸液通過帶有磁性的分選柱。磁珠與細胞結(jié)合后會被吸附在分選柱中,而未標(biāo)記的細胞則隨緩沖液流出。

  3.2洗滌分選柱以去除未結(jié)合的磁珠和雜質(zhì)。

  3.3使用適當(dāng)?shù)木彌_液將吸附在分選柱上的目標(biāo)細胞洗脫,收集洗脫液中的細胞。

  

4.細胞收集與鑒定:

  4.1收集洗脫的細胞,并進行必要的洗滌步驟以去除殘留的磁珠。

  4.2使用流式細胞術(shù)或其他細胞鑒定方法檢查細胞的純度和活性。

  

5.實驗注意事項:

  5.1在整個實驗過程中,應(yīng)保持細胞的低溫處理,以維持細胞活性。

  5.2操作時應(yīng)輕柔,避免對細胞造成機械性損傷。

  5.3確保使用的磁珠和抗體特異性高,以提高分選效率和純度。

  


  

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