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人肝癌原位小鼠動(dòng)物模型實(shí)驗(yàn)

簡(jiǎn)要描述:人肝癌原位小鼠動(dòng)物模型實(shí)驗(yàn)

構(gòu)建人肝癌原位小鼠動(dòng)物模型是為了模擬人類(lèi)肝癌的生長(zhǎng)和發(fā)展,以便于研究肝癌的發(fā)病機(jī)制、藥物篩選和治療策略的評(píng)估。

  • 更新時(shí)間:2024-10-30
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詳細(xì)介紹

人肝癌原位小鼠動(dòng)物模型實(shí)驗(yàn)

構(gòu)建人肝癌原位小鼠動(dòng)物模型是為了模擬人類(lèi)肝癌的生長(zhǎng)和發(fā)展,以便于研究肝癌的發(fā)病機(jī)制、藥物篩選和治療策略的評(píng)估。


以下是人肝癌原位小鼠動(dòng)物模型實(shí)驗(yàn)的一般步驟:

  1.選擇合適的小鼠品系:通常選擇免疫缺陷的小鼠品系,如裸鼠(nude mice)或NOD/SCID小鼠,以減少對(duì)人肝癌細(xì)胞的免疫排斥。

  2.準(zhǔn)備肝癌細(xì)胞:選擇合適的人肝癌細(xì)胞系,如HepG2、Huh-7等,并在體外培養(yǎng)至適宜的密度和傳代。

  3.細(xì)胞接種:將肝癌細(xì)胞懸液直接注入小鼠的肝臟內(nèi),通常通過(guò)腹腔注射或切開(kāi)肝臟進(jìn)行原位接種。接種量需根據(jù)小鼠的大小和預(yù)期的腫瘤負(fù)荷來(lái)決定。

  4.模型監(jiān)控:接種后,定期監(jiān)測(cè)小鼠的體重和健康狀況,使用影像學(xué)方法(如超聲心動(dòng)圖)跟蹤腫瘤的生長(zhǎng)。

  5.實(shí)驗(yàn)終點(diǎn):根據(jù)研究目的設(shè)定實(shí)驗(yàn)終點(diǎn),可能是腫瘤體積達(dá)到一定大小、小鼠出現(xiàn)明顯癥狀或?qū)嶒?yàn)預(yù)定時(shí)間到達(dá)。

  6.樣本收集:在實(shí)驗(yàn)終點(diǎn)處死小鼠,收集腫瘤組織和相關(guān)器官樣本,進(jìn)行后續(xù)的組織學(xué)和分子生物學(xué)分析。


例如:

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物: 裸鼠,雌雄各半,4-6周,18-20g

造模方法: 將Huh-7細(xì)胞消化后,收集到一起。無(wú)血清的培養(yǎng)基洗滌一次后進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。將計(jì)數(shù)好的細(xì)胞用無(wú)血清的培養(yǎng)基重懸調(diào)整細(xì)胞密度待用。采用裸鼠進(jìn)行腹腔麻醉,取仰臥位固定在手術(shù)板上,常規(guī)皮膚消毒,在裸鼠左肋下作一橫行切口,然后逐層剪開(kāi)皮膚暴露肝左葉。用細(xì)胞懸液,30°角刺入肝臟左葉,緩慢的注入細(xì)胞懸液,注射完畢后用無(wú)菌紗布輕壓針孔至肝臟表面不再出血,逐層縫合關(guān)腹,待小鼠清醒后放回原飼養(yǎng)環(huán)境。



浙江大學(xué)趙斌及梁廷波團(tuán)隊(duì)通過(guò)體內(nèi)原位基因編輯技術(shù)建立了25種具有特定基因型的原發(fā)性小鼠肝癌模型,并通過(guò)多組學(xué)聯(lián)合分析闡明了這些

模型的異質(zhì)性特征。這些模型能夠更好地模擬人類(lèi)肝癌的多樣性和復(fù)雜性,適用于機(jī)制研究和臨床前測(cè)試。


在建模過(guò)程中,應(yīng)嚴(yán)格遵守動(dòng)物福利和倫理規(guī)定,確保實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的合理性和必要性。在進(jìn)行實(shí)驗(yàn)前,應(yīng)獲得相應(yīng)倫理委員會(huì)的批準(zhǔn)。


參考

[1]尹君, 李景丁莎, 左從林, 等. 人源性肝癌細(xì)胞小鼠原位移植瘤模型的建立及特點(diǎn)的比較研究[J]. 中國(guó)比較醫(yī)學(xué)雜志, 2018,28(12):68-74.

[2]Tang M, Zhao Y, Zhao J, et al. Liver cancer heterogeneity modeled by in situ genome editing of hepatocytes[J]. Sci Adv, 2022,8(25):eabn5683.



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