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腫瘤細胞Transwell

簡要描述:腫瘤細胞Transwell:Transwell 應該是一種實驗技術,這項技術的主要材料是Transwell小室(Transwell chamber, Transwell insert),其外形為一個可放置在孔板里的小杯子,

  • 更新時間:2022-12-23
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詳細介紹

將Transwell小室放入培養(yǎng)板中,小室內稱上室,培養(yǎng)板內稱下室,上室內盛裝 上層培養(yǎng)液,下室內盛裝下層培養(yǎng)液,上下層培養(yǎng)液以聚碳酸酯膜相隔。我們將細胞種在上室內,由于聚碳酸酯膜有通透性,下層培養(yǎng)液中的成分可以影響到上室內的細胞,從而可以研究下層培養(yǎng)液中的成分對細胞生長、運動等的影響。應用不同孔徑和經(jīng)過不同處理的聚碳酸酯膜,就可以進行共培養(yǎng)、細胞趨化、細胞遷移、細胞侵襲等多種方面的研究。當然不同細胞其體積不同,具體選擇時要考慮到細胞大小。這里主要談幾種大家常用的實驗:
(1) 共培養(yǎng)體系:
小于3.0um孔徑條件下,細胞不會遷徙通過,因此,若研究不涉及細胞運動能力,不需要細胞穿過聚碳酸酯膜,則應選擇3.0μm以下孔徑。常用0.4、3.0um。我們實驗室用的是0.4μm。將細胞A種于上室,細胞B種于下室,可以研究細胞B分泌或代謝產(chǎn)生的物質對細胞A的影響。
(2)趨化性實驗:
可用5.0、8.0、12.0μm膜,上室細胞可穿過聚碳酸酯膜進入下室,計數(shù)進入下室的細胞量可反映下室成分對上室細胞的趨化能力。
①細胞B對細胞A的趨化作用:將細胞A種于上室,細胞B種于下室,可以研究細胞B分泌或代謝產(chǎn)生的物質對細胞A的趨化作用。
②趨化因子對細胞的趨化作用:將細胞種于上室,下室加入某種趨化因子,可研究該趨化因子對細胞的趨化作用。

(3)腫瘤細胞遷移實驗:
常用8.0、12.0μm膜,上室種腫瘤細胞,下室加入FBS或某些特定的趨化因子,腫瘤細胞會向營養(yǎng)成分高的下室跑,計數(shù)進入下室的細胞量可反映腫瘤細胞的遷移能力。

(4)腫瘤細胞侵襲實驗常用8.0、12.0um 膜,原理與腫瘤細胞遷移實驗類似。transwell侵襲實驗,其實原理簡單地說就是用一層膜將高營養(yǎng)的培養(yǎng)液和低營養(yǎng)的培養(yǎng)液隔開,細胞放在低營養(yǎng)的培養(yǎng)液里,為了找吃的,細胞會往高營養(yǎng)的培養(yǎng)液里面跑,但是有膜擋著,所以要穿過膜才行。我們在膜上涂上一層基質膠,模仿細胞外基質,于是細胞要把基質消化了才可以從低營養(yǎng)的培養(yǎng)液跑到高營養(yǎng)的培養(yǎng)液里面,后我們檢測高營養(yǎng)的培養(yǎng)液.里細胞量就可以知道細胞的侵襲能力了。

 

 

 

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