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一.細胞復蘇與培養(yǎng)將液氮或-80℃保存的腫瘤細胞于37℃水浴，快速溶化，用8.0ml培養(yǎng)基混勻已融化的腫瘤細胞懸液，于1500轉(zhuǎn)/分，離心3分鐘。棄上清，再吸取8.0ml培養(yǎng)基質(zhì)混勻細胞沉淀，再1500轉(zhuǎn)/分，離心3分鐘，棄上清，細胞沉淀用1.0ml培養(yǎng)基混勻，備用。另取一個75cm2方瓶，加入14.0ml培養(yǎng)基質(zhì)，將上述制備的含腫瘤細胞懸液(1.0ml)加入此方瓶中，于37℃，5%CO2孵育箱中培養(yǎng)。若此腫瘤細胞懸浮生長，大約3－4天細胞基質(zhì)會變黃，5.0ml細胞懸液可傳代...

免疫熒光標記技術(shù)（immunofluorescencetechnique）是將已知的抗體或抗原分子標記上熒光素，當與其相對應的抗原或抗體起反應時，在形成的復合物上就帶有一定量的熒光素，在熒光顯微鏡下就可以看見發(fā)出熒光的抗原抗體結(jié)合部位，檢測出抗原或抗體。實驗材料懸浮細胞試劑、試劑盒多聚-L-賴氨酸儀器、耗材離心機培養(yǎng)箱實驗步驟1.細胞在冰浴中冷卻，然后用臺式離心機于4℃以800g離心5min，吸去培養(yǎng)液并以4℃PBS重懸細胞。2.離心吸去PBS，以1~2ml2%PFA固定液，...

進行實驗動物灌流是獲得良好的形態(tài)學觀察結(jié)果以及保存腦、腎、心臟和其他許多器官所必需的。對于未經(jīng)訓練的實驗人員，初次進行灌流可能會失敗，故建議首先用一些對照實驗動物練習，以熟悉此過程?；痉桨笇嶒灢牧闲∈笤噭⒃噭┖蠵BS儀器、耗材23-G針頭注射管解剖器械實驗步驟1.一支針管吸滿1×PBS，另一支吸4%PFA固定液（4℃），擱置待用。2.在袋中用CO2氣體處死小鼠。停止吸呼后，立刻背朝下放平小鼠，小心剖開胸腔防止過多出血，小心并迅速切開肋骨，剪去橫隔膜，暴露心臟。3.小心將吸...

名稱：實驗動物的取血關(guān)鍵詞：動物,取血,方法目的：規(guī)范實驗動物(家兔、狗，豚鼠)取血的方法和途徑,主體內(nèi)容：（一）家兔1．耳緣靜脈取血法選好耳緣靜脈，拔去被毛，用二甲苯或酒精涂擦局部，小血管夾夾緊耳根部，使血管充血擴張。術(shù)者持粗針頭從耳尖部血管，逆回流方向刺入靜脈內(nèi)取血，或用刀片切開靜脈，血液自動流出，取血后棉球壓迫止血，取血量2～3ml。壓住側(cè)支靜脈，血液更容易流出；取血前耳緣部涂擦液體石蠟，可防止血液凝固。2．耳中央動脈取血法家兔固定箱內(nèi)，用手揉擦耳部，使中央動脈擴張。左...

實驗方法原理藥物半數(shù)致死量LD50是指藥物急性毒性實驗中，當動物死亡率為50%時的單次給藥劑量，單位通常為mg/kg。例如，當某藥物給予400mg劑量時，可致使一半家兔（體重約為4kg）死亡，則其LD50值為100mg/kg。LD50值通常反映藥物急性毒性的大小。藥物的急性毒性、慢性毒性實驗同屬于一般毒理學的研究范疇。此外，藥物毒理學研究尚包括特殊毒理學（致癌、致畸、致突變）、藥物依賴性及過敏反應實驗等。各種屬動物均可用于藥物LD50值的測定，通常使用嚙齒類動物（大鼠和小鼠）...

【實驗目的】1.學習大鼠胃潰瘍(gastriculcer)模型建立的方法。2．觀察藥物對實驗性胃潰瘍的防治作用。3．了解組織切片和HE染色方法?！緦嶒炘怼肯詽?pepticulcer)是由多種因素引起的一種常見病。正常情況下，機體有胃黏液、胃黏膜屏障（mucosalbarrier）、黏膜細胞更新以及胃、十二指腸節(jié)律性運動功能等一系列保護性機理，使胃、腸黏膜不受損傷。但過度的精神緊張、情緒激動，會使神經(jīng)系統(tǒng)和內(nèi)分泌功能紊亂；飲食失調(diào)，如粗糙食物，骨刺等對黏膜的物理性損害...

實驗材料細胞樣品試劑、試劑盒RNA提取試劑盒熒光定量PCRMixTRIZOLdNTP氯仿逆轉(zhuǎn)錄酶MMLV異丙醇Taq酶DEPC水ddH2OTEMgCl2瓊脂糖溴化乙錠MOPS甲醛乙酸鈉EDTAEB溴酚蘭儀器、耗材離心管離心機風光光度計電泳槽凝膠板RealtimePCR儀一、樣品RNA的抽提1.取凍存已裂解的細胞，室溫放置5分鐘使其*溶解。2.兩相分離每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的氯仿，蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃...