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當(dāng)前位置:首頁  >  技術(shù)文章

  • 2022

    5-14

    激光掃描共聚焦顯微鏡可測(cè)定的樣品種類很多.包括生物材料、組織(切片)、細(xì)胞(亞細(xì)胞)結(jié)構(gòu)等。樣品中熒光的來源主要有如下幾種:自發(fā)熒光(autofluorescence)、熒光染色、免疫熒光、熒光蛋白、誘發(fā)熒光(inducedfluorescence)及酶致熒光(enzymaticallyproducedfluorescence)等等。其中大部分熒光素的激發(fā)和發(fā)射波長(zhǎng)均可在儀器自帶軟件的染料信息庫中找到。1.觀察步驟及儀器操作根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求制備樣品完畢后。即可進(jìn)行觀察?;静襟E如...

  • 2022

    5-14

    人非小細(xì)胞肺癌裸鼠原位種植轉(zhuǎn)移模型的建立:(1)探討肺癌遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移和阻斷其遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的研究;(2)模擬晚期非小細(xì)胞肺癌轉(zhuǎn)移的自然發(fā)生過程;(3)在活體動(dòng)物的完整器官內(nèi)評(píng)估瘤細(xì)胞播散和腫瘤的生長(zhǎng)。實(shí)驗(yàn)方法原理將表達(dá)GFP的質(zhì)粒pRNAT-U6/Neo轉(zhuǎn)染人肺腺癌細(xì)胞A549,G418篩選獲得穩(wěn)定表達(dá)GFP細(xì)胞,對(duì)比轉(zhuǎn)染前后細(xì)胞的生長(zhǎng)活性和成瘤性。將轉(zhuǎn)染后細(xì)胞原位種植裸鼠預(yù)定標(biāo)準(zhǔn)處死。HE染色和免疫組化檢測(cè)轉(zhuǎn)移灶的位置和數(shù)目。利用KODAKIS2000MM系統(tǒng)檢測(cè)腫瘤播散情況。實(shí)驗(yàn)材...

  • 2022

    5-14

    人胃癌高轉(zhuǎn)移模型的建立可以:(1)研究腫瘤轉(zhuǎn)移機(jī)制;(2)研究腫瘤防治;(3)為腫瘤轉(zhuǎn)移研究提供更為理想的動(dòng)物模型。腫瘤組織塊原位移植法實(shí)驗(yàn)方法原理用人胃癌組織塊SGC-7901原位移植于SCID小鼠,第4周末移植瘤向淋巴結(jié)和肝臟等器官轉(zhuǎn)移,轉(zhuǎn)移率達(dá)66.7%(2/3),第6周末轉(zhuǎn)移率高達(dá)*(10/10)。實(shí)驗(yàn)材料雄性SPF級(jí)SCID小鼠人胃癌組織SGC-7901試劑、試劑盒水合氯醛福爾馬林液儀器、耗材飼養(yǎng)籠光學(xué)顯微鏡石蠟實(shí)驗(yàn)步驟一、實(shí)驗(yàn)材料準(zhǔn)備1.雄性SPF級(jí)SCID小鼠,...

  • 2022

    5-14

    人胰腺癌裸小鼠模型實(shí)驗(yàn)方法原理將人胰腺癌細(xì)胞株8988接種于裸鼠腋窩處皮下,每周測(cè)量腫瘤大小,第42d處死小鼠。腫瘤組織及相關(guān)臟器送病理及電鏡檢查,放射免疫法檢測(cè)相關(guān)抗原。皮下腫瘤組織細(xì)胞及細(xì)胞株培養(yǎng),HE染色。實(shí)驗(yàn)材料裸小鼠BALBcnu-nu胰腺癌細(xì)胞株8988試劑、試劑盒RPMI-1640*培養(yǎng)基胰酶戊二醛儀器、耗材CO2培養(yǎng)箱試管實(shí)驗(yàn)步驟一、實(shí)驗(yàn)材料準(zhǔn)備裸小鼠BALB/cnu-nu,4~6周齡,體重16~20g,雌雄兼?zhèn)?,SPF級(jí)環(huán)境中飼養(yǎng),恒溫25~27℃,恒濕45...

  • 2022

    5-7

    試劑、試劑盒Taq聚合酶溶于水的DNA引物儀器、耗材熱循環(huán)儀實(shí)驗(yàn)步驟一、材料1.酶和酶緩沖液Taq聚合酶許多Taq聚合酶都可以用;作者發(fā)現(xiàn)Roche公司的Taq聚合酶可以滿足大多數(shù)需要.如果需要提高PCR產(chǎn)物的特異性,應(yīng)該使用熱啟動(dòng)聚合酶。使用Tag聚合酶本身附帶的緩沖液。2.核酸和寡核苷酸(1)溶于水的DNA如果DNA在TE中,應(yīng)該在PCR反應(yīng)混合物中添加MgCl2.如果用從石蠟包埋的組織中純化的DNA做模板,選擇的STR標(biāo)記的大小應(yīng)該是78~250bp,因?yàn)檫@些DNA模板...

  • 2022

    5-7

    免疫熒光方法中的重要環(huán)節(jié):1、冰凍切片制備:建議用新鮮組織,否則組織細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)破壞,易使抗原彌散。選用干凈鋒利的刀片、組織一定要冷凍適度等,防止裂片和脫片嚴(yán)重。2、組織切片固定:切好片風(fēng)干后立即用冰丙酮等固定液進(jìn)行固定5-10min,尤其要較長(zhǎng)時(shí)間保存的白片,一定要及時(shí)固定和適當(dāng)保存。3、血清封閉:為防止內(nèi)源性非特異性蛋白抗原的結(jié)合,需要在一抗孵育前先用血清(與二抗來源一致)封閉,減弱背景著色。血清封閉的時(shí)間是可以調(diào)整的,一般10-30min。4、一抗孵育條件:在免疫組化反...

  • 2022

    5-7

    免疫熒光標(biāo)記技術(shù)(immunofluorescencetechnique)是將已知的抗體或抗原分子標(biāo)記上熒光素,當(dāng)與其相對(duì)應(yīng)的抗原或抗體起反應(yīng)時(shí),在形成的復(fù)合物上就帶有一定量的熒光素,在熒光顯微鏡下就可以看見發(fā)出熒光的抗原抗體結(jié)合部位,檢測(cè)出抗原或抗體。實(shí)驗(yàn)材料組織樣品試劑、試劑盒PBS抗體儀器、耗材玻片加濕盒實(shí)驗(yàn)步驟1.將濕紙巾鋪于載玻片盒底部做成加濕盒,由冰凍切片儀中取出載有切片的載玻片,放入玻片盒中(每邊放6片),或故濕盒中(載玻片勿相互接觸)。2.待載玻片達(dá)室濕且未干...

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